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        1. 上海仁捷生物科技有限公司

          人胰島素原 (PI)ELISA kit使用說(shuō)明書(shū)

          時(shí)間:2023/12/21閱讀:830

          人胰島素原  (PI)ELISA使用說(shuō)明書(shū)

          胰島素原(PI)是胰島素的前體激素  它是由由胰島β細(xì)胞合成和分泌 , 主要 在腎臟分解代謝。生理情況下 ,只有極少量的胰島素原釋放入血 ,在病理情 況下 ,胰島β細(xì)胞釋放胰島素原增多 ,血中胰島素原水平升高。 它是細(xì)胞在 裂解成成熟胰島素之前分泌的最后一個(gè)單鏈蛋白結(jié)構(gòu)。 它是由芝加哥大學(xué)的Donald F. Steiner教授在1967年發(fā)現(xiàn)的。


          本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA 。往預(yù)先包被有人 胰島素原(PI)捕獲抗體的微孔中 ,依次加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記的檢測(cè) 抗體 HRP  酶結(jié)合物 , 中間經(jīng)過(guò)溫育和洗滌 ,用底TMB  顯色 TMB 在過(guò) 氧化物酶(HRP)的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色 ,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色 的深淺和樣品中的人胰島素原(PI)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm  波長(zhǎng)下測(cè)定

          吸光度(OD   ,計(jì)算樣品濃度。

          靈敏度:4.79pg/mL

          檢測(cè)范圍12.5-800pg/mL

          特異性:可檢測(cè)樣本中人的PI ,且與其類(lèi)似物無(wú)明顯交叉反應(yīng)。

          image.png

          濃度(pg/mL)

          800

          400

          200

          100

          50

          25

          12.5

          0

          OD  

          2.32

          1.93

          1.31

          0.85

          0.51

          0.39

          0.28

          0.1

          校正 OD  

          2.22

          1.83

          1.21

          0.75

          0.41

          0.29

          0.18

          -


          試劑盒性能:

          1.    重復(fù)性 :板內(nèi)變異系數(shù)小于  10% ,板間變異系數(shù)小于  10%

          2.    回收率 :在選取的健康人血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入  3  個(gè)不同

          濃度水平的人PI ,計(jì)算回收率。

           

          樣本類(lèi)型

          范圍(%

          平均回收率(%

          血清(n=8)

          84- 101

          96

          血漿(n=8)

          92- 105

          102

          細(xì)胞培養(yǎng)上清(n=8)

          96- 108

          105

          3.    線性稀釋?zhuān)悍謩e在選取的4份健康人血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入

          高濃度人PI ,在標(biāo)準(zhǔn)曲線動(dòng)力學(xué)范圍內(nèi)進(jìn)行稀釋 ,評(píng)估線性。

           

          稀釋比例

          回收率(%

          血清

          血漿

          細(xì)胞培養(yǎng)上清

          12

          范圍

           

          84-95

           

          88-97

           

          90- 110

          平均回收率

           

          91

           

          93

           

          96

          14

          范圍

          89- 103

          87- 108

          105- 115

          平均回收率

          94

          98

          109



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