今天開講之前，先給大家看一組九宮格圖，開開眼界~~

這是將色譜柱的入口端打開后的樣子，也就是色譜柱中先接觸到樣品的填料。

正常的色譜柱入口端填料絕大多數(shù)應該是白白的、平整的，而這些是受到嚴重污染的色譜柱——變色、堵塞、雜質蓄積......

OMG！

柱子造的都沒“柱”樣了！

那怎么辦？

如何避免色譜柱過早地“夭折”呢？

 辦法還是有滴~~

通常，在分析柱前面，安裝一支保護柱就能大大減少損失。

那么，今天我們一起來學習一下，保護柱的重要性吧。

1、 為什么要使用保護柱？

2、 哪些樣品需要使用保護柱？

3、 保護柱會不會影響分離效果？

4、 如何選擇保護柱？

5、保護柱的使用及注意事項有哪些？

01

 為什么使用保護柱呢？

樣品上機檢測前，一般會經前處理去除雜質，但是不能*避免，來自于樣品及色譜系統(tǒng)的微小的固體顆粒物、色素雜質、未沉淀的蛋白等，可能會滯留在色譜柱中，從而導致色譜柱耐用性差、壽命縮短。

保護柱是安裝在分析柱之前的小柱，能起到分離凈化的作用，大大降低分析柱受污染的程度，延長分析柱使用壽命，因此為您節(jié)省很多的耗材費用。

02

 哪些樣品需要使用保護柱？

常規(guī)的液相色譜檢測中均需要使用保護柱，特別是對于食品、中藥、天然產物、合成中間體、復雜制劑及血漿等生物樣品的檢測，因待測基質的復雜性，可能會導致色譜系統(tǒng)壓力升高、色譜柱堵塞、填料變色、測試結果不準確等各種影響。

03

保護柱會不會影響分離效果？

通常來講，理想的保護柱填料與分析柱填料一致，具有相同的選擇性，被測物基本上全被洗脫出來，不會影響待測物的響應值。

保護柱柱長選擇恰當?shù)脑?，不會產生峰擴散，也基本不會引起分離度的降低。

圖1 是安裝卡套式保護柱后的對比色譜圖，保留時間略微有延遲（原因是安裝了保護柱，色譜柱相當于長了一點點）?？傮w來講，卡套式保護柱對分析結果基本無影響。

圖1

【液相條件】
色譜柱：CAPCELL PAK C18 MGIII-H S3; 2.0 mm i.d. x 100 mm
保護柱：CAPCELL PAK C18 MGIII-H S3; 2.1 mm i.d. x 5 mm
流動相：60%乙腈
流　速：0.5 mL/min
溫　度：40℃
檢　測：UV 254 nm
樣　品：萘（峰4）

04

 如何選擇保護柱？

1、保護柱與分析柱應具有相同填料、相同粒徑、相同內徑，以確保選擇性一致（同一個品牌）。

2、一般長度為10mm的保護柱可以起到充分的保護作用，過長的話可能會引起待測物的譜帶擴張。

3、盡量選擇可更換柱芯的的保護柱，柱芯價格相對便宜，易于使用和維護，而且死體積小。

4、如果是用于UHPLC柱，還要考慮一下保護柱的耐壓能力。

05

 保護柱的使用及注意事項有哪些？

安裝

1、卡套式保護柱一般標注液流方向，請按照色譜柱標簽所示方向進行安裝，盡量不要雙向混用。

2、卡套式保護柱可以更換柱芯，對于CAPCELL PAK 系列保護柱，即使柱芯內徑不同，只要柱芯的長度相同，柱套既可通用。

3、保護柱與卡套組裝好后，請直接連接在色譜柱入口端。一般用手擰緊卡套即可，如有漏液發(fā)生，可再使用扳手擰緊30°，用力太過有可能導致壓環(huán)變形。

使用注意事項

1、專柱，避免保護柱成為不同項目的交叉污染源。

2、當色譜峰的理論塔板數(shù)下降，柱壓上升，或是關鍵分離度下降時，都應該及時更換保護柱。

3、不慎發(fā)生強污染時，可以將分析柱卸下，單獨沖洗保護柱，可以使污染物更快的從保護柱中流出。

4、保護柱或柱芯一般不建議超聲清洗，因可能對填料表面修飾有影響，當柱效下降時直接更換柱芯。

后，再給大家介紹2款靠譜的保護柱吧，一款是應用于HPLC的保護柱，另一款是應用于UHPLC的保護柱。

TIPs 知識擴展

1 CAPCELL PAK 卡套式保護柱 （應用于HPLC）

產品特點

1、應用于高效液相色譜，CAPCELL PAK 系列分析柱均有配套的保護柱。

2、CAPCELL PAK 保護柱，即使柱芯內徑不同，只要柱芯的長度相同既可通用。

3、只對單價較低的柱芯進行更換即可實現(xiàn)對分析柱的保護。

.2 CAPCELL EXP 卡套式保護柱 （應用于UHPLC）

產品特點

1、高耐壓 100 MPa，可用于超高效液相色譜。

2、幾乎無擴散，對分離的影響降低到極低限度。

3、可直接連接到色譜柱上，不會產生死體積的影響。

4、不需要工具，用手擰緊即可簡便連接。