CHL倉(cāng)鼠肺細(xì)胞培養(yǎng)傳代 我公司——依托復(fù)旦大學(xué),集研發(fā)、銷售、實(shí)驗(yàn)室技術(shù)服務(wù)于一體的高科技企業(yè)。 專業(yè)經(jīng)營(yíng)進(jìn)口胎牛血清、細(xì)胞因子、ELISA試劑盒、細(xì)胞、抗體、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、其產(chǎn)品吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,代做ELISA實(shí)驗(yàn)等。產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。全國(guó)范圍內(nèi)免
CHL倉(cāng)鼠肺細(xì)胞培養(yǎng)傳代就像養(yǎng)孩子,甚至比養(yǎng)孩子還難。培養(yǎng)液的問(wèn)題比較大。因 此配制培養(yǎng)液后一定要做無(wú)菌試驗(yàn),過(guò)濾時(shí)要注意濾膜本身及其安裝是否有問(wèn)題;其次,要排除培 養(yǎng)液保存問(wèn)題,比如,瓶蓋有裂隙或者是蓋子與瓶口不合,密閉性差,容易細(xì)菌污染。還有就是操 作過(guò)程中出了問(wèn)題,不注意無(wú)菌操作,消毒不嚴(yán)格,造成培養(yǎng)液的污染。超凈工作臺(tái)、手的消毒, 拿培養(yǎng)瓶時(shí)不要拿蓋子及其周圍,培養(yǎng)液開(kāi)蓋后要斜著放,瓶蓋橫放,蓋口不要向上或向下,培養(yǎng) 瓶等盡量放在工作臺(tái)的中間等等??傊?,關(guān)鍵是無(wú)菌及無(wú)菌操作,做到這兩點(diǎn)應(yīng)該不會(huì)出什么差錯(cuò) 了。
實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)內(nèi)容。歡迎廣大師生選購(gòu)。
關(guān)鍵詞:
簡(jiǎn)介:全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格,全國(guó)各地均可發(fā)貨,遠(yuǎn)到香港、澳門、福建、新疆、內(nèi)蒙古等地:
產(chǎn)品名稱:
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
細(xì)胞規(guī)格:株
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):無(wú)支原體、無(wú)污染、符合標(biāo)準(zhǔn)
運(yùn)輸方式:新鮮運(yùn)輸和凍存管運(yùn)輸
貨期:新鮮運(yùn)輸需要1-2周,凍存管運(yùn)輸?shù)男枰?-3天
我公司致力于生物醫(yī)藥領(lǐng)域的技術(shù)研發(fā)與生物試劑的銷售,力求為中國(guó)廣大生物科技研究者提供zui快捷的貼心服務(wù)。公司集研發(fā)、銷售、實(shí)驗(yàn)室技術(shù)服務(wù)于一體,并以多家歐美研究平臺(tái)先進(jìn)的技術(shù)實(shí)力為依托,向中國(guó)市場(chǎng)提供品質(zhì)國(guó)內(nèi)價(jià)格的*服務(wù),專業(yè)提供實(shí)驗(yàn)所需的各類細(xì)胞株,因子,抗體等多種生物試劑。公司細(xì)胞主要來(lái)源ATCC,ECACC,ScienCell,ACC, Invitrogen 等,以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外大學(xué)建系。同時(shí)提供各種技術(shù)服務(wù) 整體課題 論文(SCI)服務(wù)等。輕小利,重品質(zhì)。避浮夸,求務(wù)實(shí)。您的滿意,將是我們不懈的追求。竭誠(chéng)歡迎廣大生物科技研究老師,前來(lái)咨詢合作
復(fù)蘇操作步驟:
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃
2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
3.在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過(guò)毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等
迅速解凍:
1. 迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化,時(shí)間控制在1分鐘左右
離心去除凍存液:
1. 融解好的細(xì)胞迅速放進(jìn)離心機(jī)中,2000r/min 或者600g離心2min
2. 吸棄上清液。
3. 用4-5ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,吹打制成單細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜。
4. 將復(fù)蘇好的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi),8-24小時(shí)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞生長(zhǎng)情況而定
凍存液成分:10%DMSO + 40%血清+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液
污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形? 研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因? 研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因? 冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次擰緊。
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