HAKATA 熱滅活胎牛血清，貨號(hào)：10100-147   

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HAKATA 熱滅活胎牛血清，貨號(hào)：10100-147

公司主營(yíng)業(yè)務(wù)：胎牛血清（HAKATA、HyClone、SERANA、NTC、Corning、BOVOGEN、PAA、PAN、SIGMA），無(wú)外泌體血清(SBI)，ELISA試劑盒，細(xì)胞（800多株通過(guò)STR鑒定），代購(gòu)ATCC原代細(xì)胞，HAKATA、HyClone培養(yǎng)基（干粉、液體）、雙抗、胰酶，CST，Abcam，Sigma等抗體。

1、如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損   

將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2～8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、纖粘蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清，并避免反復(fù)凍融。 建議血清應(yīng)保存在-20℃。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶，建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

2、血清中包含絮狀沉淀，他們是什么，怎么處理？

沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清（400g，1～2分鐘）或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里（一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾）。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以，使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃，沉淀會(huì)自然消失.

3、如何避免血清中產(chǎn)生沉淀？

（1）解凍血清時(shí)，隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。   

（2）血清分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一。   

（3）勿由-20℃直接放置于37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。   

（4） 勿將血清置于37℃太久，否則血清會(huì)變得渾濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。   

（5） 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。   

（6） 若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。

4、培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可以長(zhǎng)期保存嗎？

一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，盡量在1個(gè)月內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞挚赡茉诮鈨龊缶烷_(kāi)始降解。  

5、細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎？如何處理？   

在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。

（1）細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老，破碎的細(xì)胞殘骸；

（2）血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果；

（3）配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長(zhǎng)；

（4）配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱?yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn)；

（5）培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。  

 6、細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成？

（1） 盡可能地減少血清凍融次數(shù)；

（2） 培養(yǎng)基無(wú)需37℃水?。?

（3） 培養(yǎng)基保持*PH值7.0~7.2；

（4） 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗；

（5） 掌握細(xì)胞傳代的*時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老。

7、 為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué) 研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。

8、有必要做熱滅活嗎?

實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或*沒(méi)有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物 的分裂擴(kuò)增。若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量!

1. 小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?

來(lái)源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過(guò)心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。
    組份與比例不同：兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同，用途與用法不同：某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng)，而有些細(xì)胞只需小牛血清即可，使用濃度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%。

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Ectl/E6E7，人宮頸細(xì)胞

Endl/E6E7，人子宮內(nèi)膜細(xì)胞

Vk2/E6E7，人陰道上皮細(xì)胞

HOSEpiC，人卵巢上皮細(xì)胞

HD11，雞巨噬細(xì)胞

LMH，雞肝癌細(xì)胞

skvo3，人卵巢癌細(xì)胞

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BMSC,大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

Huh7，人肝癌細(xì)胞系

hASMC，人氣道平滑肌細(xì)胞

MIO-M1,人視網(wǎng)膜Muller干細(xì)胞

MLE-15，小鼠肺上皮永生化細(xì)胞

MDA-MB-134，人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

HBL-1，人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞  男性

U2932，人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞  女性

HEEC，人食道上皮細(xì)胞

Het-1A，人食道上皮細(xì)胞

GEO, 人結(jié)腸癌細(xì)胞

MODE-K ，小鼠小腸上皮細(xì)胞系

IEC-6，大鼠小腸上皮細(xì)胞

FHC，正常人結(jié)腸黏膜細(xì)胞

A2780/Taxol，人卵巢癌紫杉醇耐藥株

A549/Taxol，人肺癌紫杉醇耐藥株

A549/DDP細(xì)胞，人肺腺癌/順鉑耐藥株

BEL/FU，人肝癌氟尿嘧啶耐藥株

BIU-87/ADR，人膀胱癌阿霉素耐藥株

COC1/DDP，人卵巢癌順鉑耐藥株

HCT8/FU，人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株

HCT8/V,人結(jié)腸癌長(zhǎng)春新堿耐藥株

HCT8/Taxol,人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株

HL-60/Adr，人白血病阿霉素耐藥株

PATU8988/FU，人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株

SGC7901/DDP，人胃癌順鉑耐藥株

L1210/DDP,小鼠白血病耐順鉑細(xì)胞株

lovo/Adr，人結(jié)腸癌耐阿霉素細(xì)胞株

hct116/L，人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株

K562/Adr，人白血病阿霉素耐藥株

MCF-7/ADR細(xì)胞，人耐阿霉素乳腺癌細(xì)胞

H1975/培美曲塞，人肺腺癌細(xì)胞培美曲塞耐藥株

H446/VP，人肺癌依托泊苷耐藥株

BIU-87/ADR，人膀胱癌阿霉素耐藥株

ECA109/VCR，人食管癌長(zhǎng)春新堿耐藥株

MUTZ-5細(xì)胞，急性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞白血病細(xì)胞

MV-4-11細(xì)胞，急性髓性白血病細(xì)胞

NALM-1細(xì)胞，急變期慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞

NALM-19細(xì)胞，急性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞白血病細(xì)胞

NALM-6細(xì)胞，急性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞白血病細(xì)胞

NAMALWA細(xì)胞，Burkitt淋巴瘤細(xì)胞