上海細(xì)胞庫(kù)，Het-1A，人食道上皮細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)試劑*：

上海蒂科生物主營(yíng)業(yè)務(wù)：胎牛血清（HAKATA、HyClone、SERANA、NTC、Corning、BOVOGEN、PAA、PAN、SIGMA），無(wú)外泌體血清SBI，ELISA試劑盒，細(xì)胞（400多種類(lèi)通過(guò)STR鑒定），培養(yǎng)基（干粉、液體），雙抗，胰酶，CST,abcam,sigma等抗體。詳詢(xún)（同號(hào)），。

細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室里zui常見(jiàn)和zui基本的實(shí)驗(yàn)了，但卻不是zui簡(jiǎn)單的。別小看細(xì)胞培養(yǎng)，這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問(wèn)。有時(shí)候細(xì)胞狀態(tài)不好，轉(zhuǎn)染、藥篩這些實(shí)驗(yàn)根本就沒(méi)辦法做。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說(shuō)起。 

上海細(xì)胞庫(kù)，Het-1A，人食道上皮細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)試劑*：

經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，HAKATA、HyClone、Sigma等。其中DMEM、RPMI-1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。 

◆ MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來(lái)的，其中增加了組分的范圍及濃度。 

◆ Dulbecco改良的BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。

DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。zui初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來(lái)為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L，這就是大家常說(shuō)的低糖和高糖了。 

◆ aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類(lèi)型，包括對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞。 

◆ Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)。 

◆ RPMI-1640培養(yǎng)基是專(zhuān)為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。 

以前大部分實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基，但配制過(guò)程就較為繁瑣，要溶解、調(diào)pH值，過(guò)濾，過(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生一些濃度誤差，而且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不理想，所以培養(yǎng)的效果會(huì)有差異。如果使用液體培養(yǎng)基，這種人為的誤差會(huì)減少，因?yàn)楫吘故谴笈抗I(yè)化生產(chǎn)的，批間差會(huì)很小。大家是不是感覺(jué)液體培養(yǎng)基會(huì)貴很多，以前是這樣，但現(xiàn)在非也。HyClone和Invitrogen都在國(guó)內(nèi)建立了液體培養(yǎng)基的生產(chǎn)基地，生產(chǎn)和運(yùn)輸成本大幅降低，所以現(xiàn)在的價(jià)格也只是50-60元/500ml，比干粉培養(yǎng)基貴不了多少，而且還幫你省了過(guò)濾器和時(shí)間。 

血清含有生長(zhǎng)因子可促進(jìn)細(xì)胞的繁殖，含有附著因子可促進(jìn)細(xì)胞的貼壁，同時(shí)還具有抗胰酶活性。血清同時(shí)也是礦物質(zhì)、脂類(lèi)及激素的來(lái)源。zui常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和馬血清等。牛血清是按照采血時(shí)間的早晚來(lái)分類(lèi)的。采血時(shí)間越早，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)越豐富，所含抗體也越少，因而胎牛血清適合要求高的細(xì)胞系和克隆化培養(yǎng)。由于瘋牛病的原因，到目前為止，我國(guó)政府仍然禁止從北美洲、歐洲和日本等地區(qū)進(jìn)口牛血清，因此市面上的牛血清大多來(lái)自澳洲、南美洲，或是國(guó)產(chǎn)的。  而血清批次間的差別就是不可避免的，這種差異來(lái)源于不同的制備方法和除菌方法、動(dòng)物的年齡差別及血清的儲(chǔ)存條件等，而且與取血?jiǎng)游锏膩?lái)源關(guān)系密切。不同的牧場(chǎng)、不同的氣候天氣及其他環(huán)境因素都可能影響血清的質(zhì)量。因此選好了一種血清就要盡可能長(zhǎng)期使用它。在需要更換時(shí)，也要盡量保持與原有的一批血清相似。

現(xiàn)在很多公司都提供血清預(yù)留，你一旦選定了某個(gè)批次的血清，zui好備足一年的量，這樣可以避免很多麻煩。血清固然是細(xì)胞培養(yǎng)中*的成分，但正如上文所說(shuō)，血清的批間差異大，更換血清時(shí)需要做大量的測(cè)試以取保替換的血清與原來(lái)的相似。而血清的供應(yīng)也是必須要考慮的因素。由于氣候或瘋牛病的影響，說(shuō)不定哪天血清就突然沒(méi)得賣(mài)了，那對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響可非同小可。另外，血清的價(jià)格也很昂貴，雖說(shuō)現(xiàn)在也有便宜的國(guó)產(chǎn)血清，但是高品質(zhì)的澳洲血清價(jià)格仍舊高起。因此，也有一些實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始換用無(wú)血清培養(yǎng)基。