HAKATA B-27™ 添加劑 17504-044 10ml  

★CQ★上海蒂科生物專注生物科研試劑：胎牛血清FBS（HAKATA、HyClone、SERANA、NTC、Corning、BOVOGEN、PAA、SIGMA等），無外泌體血清(SBI)，ELISA試劑盒（HAKATA自主品牌、進(jìn)口），2萬多株細(xì)胞（含400多種類通過STR鑒定），培養(yǎng)基（干粉、液體），雙抗，胰酶，sigma試劑等。本公司優(yōu)質(zhì)供應(yīng)原裝*胎牛血清，*的服務(wù)、真誠的態(tài)度、堅(jiān)持以質(zhì)取勝，做您的實(shí)驗(yàn)專家。

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★CQ★HAKATA 培養(yǎng)基、添加劑和細(xì)胞培養(yǎng)試劑旨在實(shí)現(xiàn)重現(xiàn)性和高性能結(jié)果，值得您每天信賴。無論您是在研究機(jī)構(gòu)或生產(chǎn)工廠進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，或是正在培養(yǎng)細(xì)胞，我公司HAKATA 產(chǎn)品都可以為您提供可靠的解決方案。

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★CQ★上海蒂科生物HAKATA品牌的優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品有：

產(chǎn)品         貨號(hào)       來源      規(guī)格

胎牛血清 10270-106 SOUTH AMERICA 500ml

胎牛血清 c2027050 SOUTH AMERICA 500ml

優(yōu)等胎牛血清 10091-148 新西蘭 500ml

優(yōu)等胎牛血清 10091-130 新西蘭 500ml

優(yōu)等胎牛血清 10437-028 Mexico 500ml

優(yōu)等胎牛血清 10099-141 AUSTRALIA 500ml

優(yōu)等胎牛血清 10099-133 AUSTRALIA 100ml

特級(jí)胎牛血清 16000-044 USA 500ml

特級(jí)胎牛血清 26140-079 USA 500ml

特級(jí)胎牛血清 12662-029 USA 500ml

特級(jí)胎牛血清 12664-025 USA 500ml

特級(jí)胎牛血清 10439-024 USA 500ml

特級(jí)胎牛血清 16141-079 USA ES血清 500ml

胎牛血清 30044-033 New Zealand 500ml

熱滅活胎牛血清 10082-147 USA 500ml

熱滅活胎牛血清 10100-147 AUSTRALIA 500ml

超低IgG胎牛血清 16250-078 USA 500ml

透析胎牛血清 264000-044 USA 500ml

活性炭/葡聚糖處理胎牛血清 12676-029 USA 500ml

新生牛血清 16010159 New Zealand 500ml

馬血清 16050-122 New Zealand 500ml

熱滅活馬血清 26050-088 New Zealand 500ml

豬血清 26250-084 New Zealand、USA 500ml

熱滅活胎牛血清 10500064 SOUTH AMERICA 500ml

胎牛血清 12483020 CANADA 500ml

熱滅活胎牛血清 12484028 CANADA 500ml

熱滅活胎牛血清 26140-071 USA 500ml

特級(jí)胎牛血清 10093177 New Zealand 500ml

新生牛血清 16010159 New Zealand 500ml

熱滅活新生牛血清 26010074 New Zealand 500ml

成年牛血清 16170078 New Zealand 500ml

成年牛血清 26170043 New Zealand 500ml

供體牛血清 10371029 New Zealand 500ml

供體牛血清 16030074 New Zealand 500ml

HAKATA 雙抗 15140-122 100ml

HAKATA 胰酶 25200-056 100ml

HAKATA 胰酶 25200-072 500ml

HAKATA B-27™ 添加劑 17504-044 10ml

HAKATA B-27™ 添加劑 12587-010 10ml

1640培養(yǎng)基 31800-022 1000ml

DMEM培養(yǎng)基(高糖）含丙酮酸鈉 12800017 1000ml

DMEM培養(yǎng)基(高糖) 不含丙酮酸鈉 12100046 1000ml

DMEM培養(yǎng)基(低糖） 31600034 1000ml

MEM培養(yǎng)基 41500034 1000ml

M199培養(yǎng)基 31100035 1000ml

F12培養(yǎng)基 21700075 1000ml

D-MEM/F-12培養(yǎng)基 12400-024 1000ml

IMDM培養(yǎng)基 12200-036 1000ml

OPTI MEM I不含血清培養(yǎng)基 31985070 500ml

膠原酶I、II、IV HAKATA 100mg

DMEM高糖培養(yǎng)基 C11995500BT 500ml

DMEM低糖培養(yǎng)基 C11885500BT 500ml

PBS C10010500BT 500ml

1640培養(yǎng)基 C11875500BT 500ml

DMEM/F12 C11330500BT 500ml

★CQ★解答一

>> 加雙抗只是有一定的預(yù)防作用，但不能避免污染

現(xiàn)在很多細(xì)菌對(duì)雙抗都有耐藥性，所以加了也不一定就能殺死；雙抗的保存方式的問題，青霉素在37℃下很快就會(huì)分解掉；污染的細(xì)菌是不是在抗菌譜中；如果是真菌的話雙抗就沒有什么卵用的；

★CQ★解答二

>> 養(yǎng)細(xì)胞要從源頭做起，杜絕各種污染

剛買來的或借來的細(xì)胞株，一般都會(huì)在培養(yǎng)基中添加抗生素，待通過污染測試后，大量培養(yǎng)時(shí)則不要加抗生素；

還有就是無血清培養(yǎng)時(shí)建議zuihao不加雙抗，因?yàn)闆]有血清的保護(hù)，細(xì)胞此時(shí)是比較脆弱的，很容易受到雙抗的毒副作用影響。

加雙抗并不是*除菌的方法。要防止污染除了使用雙抗，還要注意污染源大多來自換液和消化時(shí)的操作不正規(guī)，如果你在處理細(xì)胞得操作過程不規(guī)范，即便加入雙抗也很難避免污染。就像抵抗力再強(qiáng)的漢紙，如果任由自己在寒風(fēng)中、雨雪天氣里任性，像一顆海草隨風(fēng)飄搖的話，終有崩潰的一天。所以保證細(xì)胞處理過程或培養(yǎng)基配制過程中的無菌操作才是關(guān)鍵。

★CQ★解答三

>> 不是所有的細(xì)胞污染都用相同的解決辦法

很多實(shí)驗(yàn)室在遇到細(xì)胞污染，準(zhǔn)確的說是懷疑細(xì)胞受到污染（原因不明導(dǎo)致的細(xì)胞狀態(tài)不好）時(shí)，都會(huì)選擇一種處理方式——扔掉！害怕他會(huì)傳染到其他的細(xì)胞，但是往往你們?nèi)拥舻氖?ldquo;受害者”，而沒找到“真兇”。

并不是所有的細(xì)胞污染都能用扔掉解決，也并不是所有的細(xì)胞污染都可以用同一種試劑解決。

辨別細(xì)胞狀態(tài)，找到根源，“對(duì)癥下藥”才是關(guān)鍵。

（1）細(xì)菌污染 

狀態(tài)：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃，對(duì)細(xì)胞生長影響明顯。 

解決方法： 

1.仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間和壓力足夠！尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染，一定要檢查培養(yǎng)液是否存在渾濁現(xiàn)象！ 

2.可在培養(yǎng)液或血清中加支原體預(yù)防劑，以及的細(xì)菌清除劑。 

（2）霉菌及真菌污染 

狀態(tài)：肉眼觀察培養(yǎng)基，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基顏色基本無變化，不渾濁，但是培養(yǎng)基中由絮狀漂浮物，顯微鏡下觀察，若感染真菌可看到分叉細(xì)絲狀的結(jié)構(gòu)（不同種類結(jié)構(gòu)不同），若感染霉菌，顯微鏡下可看到片狀的結(jié)構(gòu)，不透明，真菌及霉菌對(duì)影響細(xì)胞的生長影響不大。 

解決方法： 

1.保證細(xì)胞房的干凈整潔，干燥的環(huán)境(潮濕的環(huán)境利于霉菌及真菌的生長)。 

2.控制外來人員進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室。 

3.對(duì)實(shí)驗(yàn)室及培養(yǎng)箱進(jìn)行*消毒，推薦使用專門針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的抑菌劑。 

4.若細(xì)胞非常珍貴，且不易獲得，可以對(duì)污染的細(xì)胞采取如下操作。 

懸浮細(xì)胞：收集細(xì)胞并離心，用PBS漂洗，重復(fù)此操作數(shù)次。貼壁細(xì)胞：用PBS輕輕沖洗細(xì)胞，重復(fù)此操作數(shù)次。加入殺滅真菌

（3）支原體感染 

狀態(tài)：顯微鏡下很難捕捉，培養(yǎng)液一般不會(huì)渾濁，國內(nèi)血清很多沒做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是生長緩慢，直至慢慢凋亡。 

解決方法： 

>>預(yù)防：實(shí)驗(yàn)室新購買的血清及培養(yǎng)基需檢測是否含有支原體，引進(jìn)的新品種細(xì)胞需做支原體檢測，向培養(yǎng)基中添加支原體預(yù)防劑。 

>>補(bǔ)救：將支原體去除劑與*培養(yǎng)液按1:800～1000比例稀釋，加入細(xì)胞正常培養(yǎng)；并根據(jù)細(xì)胞污染的嚴(yán)重程度，處理3～6次即可*清除細(xì)胞支原體污染問題。 

（4）黑膠蟲污染 

狀態(tài)：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍鏡下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液不渾濁，一般不會(huì)太影響，細(xì)胞還可以用。常?？稍谕慌?hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。

解決方法：

加入黑膠蟲去除劑，改變培養(yǎng)基的品牌。血清凍融采取逐級(jí)凍融等方法。

（5）桿菌污染

狀態(tài)：類芽孢桿菌（Paenibacillus Ash,Priest&Collin,1994）呈桿狀，革蘭氏染色陽性、陰性或可變，以周生鞭毛運(yùn)動(dòng)。當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)類芽孢桿菌污染，會(huì)在顯微鏡下看到一些桿狀游動(dòng)的小蟲子.

解決方法：

a. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有桿菌污染，棄掉培養(yǎng)基，用PBS清洗3遍；

b. 然后按1:2000 比例加入類芽孢桿菌去除劑，即：邊加邊搖勻；

c. 每天處理一次，類芽孢桿菌去除劑連續(xù)處理3-4天，即可*清除桿菌污染。

除以上污染源外，配液消毒問題、操作問題也是污染原因之一。關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細(xì)胞），37℃試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察，如果沒有細(xì)菌生長就是操作及細(xì)胞培養(yǎng)箱環(huán)境的問題。 

★CQ★TIPs：細(xì)胞操作及細(xì)胞培養(yǎng)箱環(huán)境問題如何解決？ 

1、提高細(xì)胞操作技巧，禁止交叉使用槍頭，在酒精燈火焰5公分距離內(nèi)操作。 

2、定期對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)箱消毒，培養(yǎng)箱水盤中的水也要定期更換，并使用無菌水。 

3、進(jìn)入細(xì)胞房之前及在無菌操作臺(tái)操作細(xì)胞實(shí)驗(yàn)之前需使用紫外燈照射30min。定期使用細(xì)胞房除菌劑對(duì)細(xì)胞房空間進(jìn)行處理。

4、每次開培養(yǎng)箱之前需用酒精消毒雙手。 

5、用培養(yǎng)箱除菌劑和水盤抑菌劑定期對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒。 

6、配制的培養(yǎng)基需驗(yàn)證無菌后方可進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。