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人D-乳酸ELISA檢測試劑盒操作步驟
閱讀：190 發(fā)布時間：2021-9-28人D-乳酸ELISA檢測試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
恒河猴腎細胞；RM-1
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細胞；B95-8
恒河猴腎細胞；MMK2
恒河猴腎細胞；MMK3
恒河猴肺細胞；RM-L1
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞；COS-1
恒河猴腎細胞；RM-2
恒河猴腎細胞；RM-3
恒河猴皮膚細胞；RM-S1
獼猴肌肉細胞；MMm7
獼猴皮膚細胞；MMS4
獼猴皮膚細胞；MMS7
獼猴肺細胞；MML2
魚源細胞
斑馬魚尾鰭細胞；AB.9
草魚腎細胞；GIK
草魚肝臟細胞；L8824
草魚腎細胞；GIK
團頭魴尾鰭細胞；WCF
白鰱尾鰭細胞系；SCF
散鱗鏡鯉尾鰭細胞；YZ21
鯉魚尾鰭細胞；YZ16
高背鯽魚尾鰭細胞；GBJd
興國鯉尾鰭細胞；XGL
蚊源細胞
蚊子幼蟲體細胞；Aedes albopictus clone C6/36
幼蚊細胞；C6/36