黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

    1. <dd id="lgp98"></dd>
      • <dd id="lgp98"></dd>
        1. 產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

          您好 登錄 注冊(cè)

          當(dāng)前位置:
          上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>資料下載>犬細(xì)胞間粘附分子酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用方法

          資料下載

          犬細(xì)胞間粘附分子酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用方法

          閱讀:235          發(fā)布時(shí)間:2019-4-19
          提 供 商 上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 資料大小 18.9KB
          資料圖片 下載次數(shù) 20次
          資料類型 WORD 文檔 瀏覽次數(shù) 235次
          免費(fèi)下載 點(diǎn)擊下載    

          犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

          本試劑僅供研究使用

          目的:本試劑盒用于測(cè)定熱犬血清,血漿及相關(guān)液體樣本中細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)的含量。

          實(shí)驗(yàn)原理:

          本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)水平。用純化的犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54),再與HRP標(biāo)記的細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)濃度。

          試劑盒組成:

          試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存

          說(shuō)明書(shū) 1份 1份  

          封板膜 2片(48) 2片(96)  

          密封袋 1個(gè) 1個(gè)  

          酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存

          標(biāo)準(zhǔn)品:2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存

          標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存

          酶標(biāo)試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

          樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

          顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

          顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

          終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

          濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存

          樣本處理及要求:

          1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

          2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

          3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

          4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

          5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

          6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

          7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

          犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒操作步驟

          1.        標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。

          2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

          3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

          4.         配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

          5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

          6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

          7.         溫育:操作同3。

          8.         洗滌:操作同5。

          9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

          10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

          11.     測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

          注意事項(xiàng):

          1.  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

          2.  濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

          3.  各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

          4.  請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

          5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

          6.  底物請(qǐng)避光保存。

          7.  嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

          8.  所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

          9.  本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

          10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

          計(jì)算:

          以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

          犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒試劑盒性能:

          1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。

          2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%

          檢測(cè)范圍:

          100ng/L -2000ng/L

          保存條件及有效期:

          1.試劑盒保存:;2-8℃。

          2.有效期:6個(gè)月

          收藏該商鋪

          請(qǐng) 登錄 后再收藏

          提示

          您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

          對(duì)比框

          產(chǎn)品對(duì)比 產(chǎn)品對(duì)比 聯(lián)系電話 二維碼 意見(jiàn)反饋 在線交流

          掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪
          021-39596320
          在線留言
          明星| 台前县| 仁布县| 宿迁市| 白朗县| 平原县| 河北区| 鄱阳县| 紫阳县| 新营市| 沅陵县| 偏关县| 沂水县| 广安市| 文水县| 新兴县| 璧山县| 丰城市| 安义县| 辽中县| 临夏市| 伊川县| 嘉黎县| 普宁市| 高碑店市| 炉霍县| 东城区| 通州市| 古田县| 寿宁县| 依兰县| 扶风县| 若尔盖县| 斗六市| 荆门市| 连云港市| 乐业县| 镇原县| 福建省| 金华市| 高密市|