黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

    1. <dd id="lgp98"></dd>
      • <dd id="lgp98"></dd>
        1. 產品展廳收藏該商鋪

          您好 登錄 注冊

          當前位置:
          上海谷研實業(yè)有限公司>資料下載>犬細胞間粘附分子酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用方法

          資料下載

          犬細胞間粘附分子酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用方法

          閱讀:236          發(fā)布時間:2019-4-19
          提 供 商 上海谷研實業(yè)有限公司 資料大小 18.9KB
          資料圖片 下載次數 20次
          資料類型 WORD 文檔 瀏覽次數 236次
          免費下載 點擊下載    

          犬細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書

          本試劑僅供研究使用

          目的:本試劑盒用于測定熱犬血清,血漿及相關液體樣本中細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)的含量。

          實驗原理:

          本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中犬細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)水平。用純化的犬細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54),再與HRP標記的細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中犬細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)濃度。

          試劑盒組成:

          試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存

          說明書 1份 1份  

          封板膜 2片(48) 2片(96)  

          密封袋 1個 1個  

          酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存

          標準品:2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存

          標準品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存

          酶標試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

          樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

          顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

          顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

          終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

          濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存

          樣本處理及要求:

          1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

          2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

          3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

          4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

          5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

          6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

          7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

          犬細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒操作步驟

          1.        標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。

          2.         加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

          3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

          4.         配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

          5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

          6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

          7.         溫育:操作同3。

          8.         洗滌:操作同5。

          9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

          10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

          11.     測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

          注意事項:

          1.  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

          2.  濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

          3.  各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

          4.  請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

          5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

          6.  底物請避光保存。

          7.  嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

          8.  所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

          9.  本試劑不同批號組分不得混用。

          10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

          計算:

          以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

          犬細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒試劑盒性能:

          1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。

          2.批內與批見應分別小于9%和11%

          檢測范圍:

          100ng/L -2000ng/L

          保存條件及有效期:

          1.試劑盒保存:;2-8℃。

          2.有效期:6個月

          收藏該商鋪

          登錄 后再收藏

          提示

          您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~

          對比框

          產品對比 產品對比 聯系電話 二維碼 在線交流

          掃一掃訪問手機商鋪
          021-39596320
          在線留言
          罗甸县| 随州市| 剑河县| 白水县| 蒲城县| 彝良县| 富川| 德庆县| 育儿| 开化县| 大足县| 定日县| 珲春市| 鹤山市| 马关县| 珲春市| 奉节县| 青海省| 新蔡县| 漠河县| 剑阁县| 双辽市| 溧阳市| 绥中县| 肇州县| 襄垣县| 托克托县| 和硕县| 麻栗坡县| 泉州市| 娄底市| 远安县| 鹤山市| 深泽县| 东安县| 安图县| 津市市| 永昌县| 竹溪县| 中宁县| 蚌埠市|