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人皰疹病毒 6 型 PCR 試劑盒說明書
閱讀：54 發(fā)布時間：2024-5-16| 提 供 商 | 上海谷研實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 12.4KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 54次 |
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人皰疹病毒 6 型 PCR 試劑盒說明書
【產(chǎn)品名稱】
商品名稱：人皰疹病毒 6 型 PCR 試劑盒
Name ：Human Herpesvirus-6 (HHV-6) PCR Kit
【包裝規(guī)格】50 次/盒
【產(chǎn)品及特點】
人皰疹病毒 6 型(Human Herpesvirus-6,HHV-6)是從淋巴增生性疾
病和艾滋病患者淋巴細(xì)胞中培養(yǎng)獲得的一種新病毒，可通過唾液飛沫及密
切接觸（如接吻，共用餐、飲器具等）、輸血傳播。除免疫低
下（如先天性免疫缺陷、艾滋病、長期服用免疫抑制劑等）外，絕大多數(shù)
人感染后終身都不會產(chǎn)生明顯癥狀；免疫低下者，如 HIV 感染者，當(dāng)人
體特異性免疫被削弱至一定程度時， 潛伏的病毒可被激活并產(chǎn)生急性感
染癥狀，此時會出現(xiàn)間質(zhì)性肺炎、腦炎、腦膜炎、肝炎及多器官衰竭等癥
狀，活化的病毒可大規(guī)模感染 T 淋巴細(xì)胞，使免疫功能進(jìn)一步削弱，該
病毒對人體健康有較大影響，因此檢測人皰疹病毒 6 型 DNA 具有重要意
義。本產(chǎn)品就是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的、檢測此病毒的試劑盒。本產(chǎn)品具
有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。
2.引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增人皰疹病毒 6 型病毒 DNA，與
其他病毒沒有交叉反應(yīng)。
3.提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4.PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
5.本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
【規(guī)格及成分】
成 份 編號 十孔盒包裝
PCR MagicMix 3.0 63981 1 mL（紅蓋）
超純水 109350 1 mL（亮黃色）
人皰疹病毒 6 型 PCR 引物混合液 3026yw 100 μL（白蓋）
人皰疹病毒 6 型 PCR 陽性對照
（1×10E8 拷貝/μL）
93981-3026pc 50 μL（黃蓋）
使用手冊 LZ3026 1 份
【運輸及保存】
低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。人皰疹病毒 6 型 PCR 陽性對
照需要單獨放置，不要污染其他試劑。
【自備試劑】
樣品 DNA。
【使用方法】
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA
提取試劑盒兼容。
2.如果有 N 個樣品，則需做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和
一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是人皰疹病毒 6 型 PCR 陽性
對照的 1000 倍稀釋液，其總體積等于試劑盒所需的樣品量，樣品制備陰
性對照是直接用水。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）
3.對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰
性對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成
分：
成分
N+2 個
樣品管
PCR 陰性
對照
PCR 陽性
對照
PCR Magic Mix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
人皰疹病毒 6 型通用 PCR 引物混
合液
各 2 μL 2 μL 2 μL
N+2 個樣品 DNA 模板 各 18 μL - -
PCR 陰性對照（水） - 18 μL -
PCR 陽性對照（人皰疹病毒 6 型通
用 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋
液）
- - 18 μL
4.按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng): 過程 溫度 時間
預(yù)變性 95℃ 5 min
PCR 反應(yīng)
（35 個循環(huán)）
95℃ 15 sec
55℃ 15 sec
72℃ 30 sec 最后延伸 72℃ 10 min 三、電泳檢測
5.取 5μL PCR 產(chǎn)物電泳進(jìn)行檢測。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束
后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長
度為 481bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否
則實驗無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增
以排除 PCR 抑制劑的感染。