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Asp2人胚胎腎細胞轉(zhuǎn)化細胞;FC33價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
Asp2人胚胎腎細胞轉(zhuǎn)化細胞;FC33價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 A
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 帶有編碼多組氨酸的Asp-2基因轉(zhuǎn)染293細胞,用于阿爾茨海默病的研究;表達Asp-2基因。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;250ug/ml G418
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
乳果糖 1g
乳酸測試盒 ( 測全血 ) 48 T
乳酸測試盒 ( 測血清、組織等 ) 48 T
乳酸過氧化物酶 10mg
乳酸脫氫酶測試盒 24 T
乳腺上皮細胞生長因子 5mL
軟骨 RNAout 50 次
瑞氏色素 5g
S(-) 雷氯必利 (+)- 酒石酸鹽 25mg
S1 核酸酶 5000U
S1 核酸酶 10ku
SacI 500U
SalI 1000U
SB203580(p38MAPK 抑制劑 ) 1mg
ScarabXpress T7lac 菌種 1mL
SDS 溶液 ,10%,電泳 100mL
SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 ) 20L
SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 ) 5LIM-54 (25 mg)1-methyl-3-(1-methyl-1H-indol-3-yl)-4-(pentylamino)-1H-pyrrole-2,5-dione; IM-54
8-iso Prostaglandin E1 (10 mg)9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-(8。beta。)-prost-13E-en-1-oic acid; Ovinonic acid|8-iso PGE1|8-epi PGE1; 8-iso Prostaglandin E1
(+)-Warfarin (1 mg)4-hydroxy-3-[(1R)-3-oxo-1-phenylbutyl]-2H-1-benzopyran-2-one; (R)-Warfarin; (+)-Warfarin
(R)-Lisofylline (5 mg)3,7-dihydro-1-[(5R)-5-hydroxyhexyl]-3,7-dimethyl-1H-purine-2,6-dione; (-)-Lisofylline|(R)-LSF; (R)-Lisofylline
Adapalene (500 mg)6-(4-methoxy-3-tricyclo[3。3。1。13,7]dec-1-ylphenyl)-2-naphthalenecarboxylic acid; CD 271|Differin; Adapalene
16-phenyl tetranor Prostaglandin E1 (5 mg)9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-16-phenyl-17,18,19,20-tetranor-prost-13E-en-1-oic acid; 16-phenyl tetranor PGE1; 16-phenyl tetranor Prostaglandin E1
JWH 071 (1 mg)(1-ethyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone; JWH 071
Kahweol (10 mg)3bS,4,5,6,7R,8R,9,10,10aR,10bS-decahydro-7-hydroxy-10b-methyl-5aS,8-methano-5aH-cyclohepta[5,6]naphtho[2,1-b]furan-7-methanol; Kahweol
16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2 (10 mg)9-oxo-11a,15R-dihydroxy-16-phenoxy-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 16-phenoxy tetranor PGE2; 16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2
13,14-dihydro Prostaglandin F1α (10 mg)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prostan-1-oic acid; PGFα|13,14-dihydro PGF1α; 13,14-dihydro Prostaglandin F1α
5-trans Prostaglandin F2α (tromethamine salt) (5 mg)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5E,13E-dien-1-oic acid, tris(hydroxymethyl)aminomethane salt; 5,6-trans PGF2α (tromethamine salt); 5-trans Prostaglandin F2α (tromethamine salt)
SDS-PAGE 分離膠配膠液 500mL
SDS-PAGE 濃縮膠配膠液 500mL
SDS-PAGE 上樣液,5× 1mL
SDS-PAGE 上樣液,5× 10mL
SDS-PAGE 樣品制備試劑盒 50 次