詳細(xì)介紹
表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞來源于293細(xì)胞,能表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb。
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法 1:6傳代;2天1次
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9;D18S51:18;D19S433:18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
山羊抗人 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記 300μL
山羊抗兔 IgG(Fc),堿性磷酸酶標(biāo)記 100μL
山羊抗兔 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記 100μL
山羊抗兔 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記 1000μL
山羊抗兔 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記 100 μL
山羊抗兔 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記 1000 μL
山羊抗兔 IgG,異硫氰酸熒光素標(biāo)記 0.1mg
山羊抗兔 IgG,熒光素 488 標(biāo)記 0.1mg
山羊抗兔 IgG,熒光素 555 標(biāo)記 0.1mg
山羊抗兔 IgG,藻紅蛋白標(biāo)記 0.1mg
山羊抗小鼠 IgG(H+L), 堿性磷酸酶標(biāo)記 100μL
山羊抗小鼠 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記 100μLREV 5901 (100 mg)。alpha。-pentyl-3-(2-quinolinylmethoxy)-benzenemethanol; REV 5901
LY171883 (5 mg)1-[2-hydroxy-3-propyl-4-[4-(1H-tetrazol-5-yl)butoxy]phenyl]-ethanone; LY171883
CAY10401 (1 mg)1-oxazolo[4,5-b]pyridin-2-yl-9-octadecyn-1-one; CAY10401
Colorimetric COX Assay Heme (1 ea)Heme; Colorimetric COX Assay Heme
S-methyl-L-Thiocitrulline (hydrochloride) (10 mg)N5-[imino(methylthio)methyl]-L-ornithine, dihydrochloride; Me-TC (hydrochloride); S-methyl-L-Thiocitrulline (hydrochloride)
Peroxynitrite (10 ml)peroxynitrous acid, sodium salt; Sodium Peroxynitrite; Peroxynitrite
DAN-1 EE (hydrochloride) (5 mg)4-[[(3-amino-2-naphthalenyl)amino]methyl]-benzoic acid, ethyl ester, monohydrochloride; DAN-1 EE (hydrochloride)
Prostaglandin A1 methyl ester (50 mg)15S-hydroxy-9-oxo-prosta-10,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; PGA1 methyl ester; Prostaglandin A1 methyl ester
Prostaglandin E2-PEG11-biotin (500 ug)11α,15S-dihydroxy-9-oxo-prosta-52,13E-dien-1-oyl-polyethylene glycol 11-N’-biotinoyl-1,5-diaminopentane; PGE2-PEG11-biotin; Prostaglandin E2-PEG11-biotin
Stearoyl Serotonin (5 mg)N-[2-(5-hydroxy-1H-indol-3-yl)ethyl]-octadec*; Stearoyl Serotonin
3-Deaza-2’-deoxyadenosine (25 mg)1-(2-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl)-1H-imidazo[4,5-c]pyridin-4-amine; c3dA; 3-Deaza-2’-deoxyadenosine
AS-605240 (potassium salt) (50 mg)5-(6-quinoxalinylmethylene)-2,4-thiazolidinedione, monopotassium salt; AS-605240 (potassium salt)
JWH 398 8-chloronaphthyl isomer (1 mg)(8-chloronaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 398 8-chloronaphthyl isomer
JWH 210 6-ethylnaphthyl isomer (5 mg)(6-ethylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 210 6-ethylnaphthyl isomer
山羊抗小鼠 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記 1000μL
山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記 100 μL
山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記 1000 μL
山羊抗小鼠 IgG,異硫氰酸熒光素標(biāo)記 0.1mg
山羊抗小鼠 IgG,熒光素 488 標(biāo)記 0.1mg
山羊抗小鼠 IgG,熒光素 555 標(biāo)記 0.1mg
山羊抗小鼠 IgG,藻紅蛋白標(biāo)記 0.1mg
上皮細(xì)胞生長因子 5mL