詳細(xì)介紹
人胚腎細(xì)胞;293FT*操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人胚腎細(xì)胞;293FT*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 圓形
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)SV40大T抗原,并且促進(jìn)zui適病毒產(chǎn)物的產(chǎn)生。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10% FBS;0.1 mM MEM Non-Essential + Amino Acids (NEAA) + 2 mM L-glutamine + 1% Pen-Strep (optional) + 500 ?g/ml Geneticin
傳代方法 細(xì)胞密度> 5×105 cells/ml
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:7,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問(wèn)題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
羧基磁珠 2mL
羧甲基纖維素鈉鹽 25g
羧肽酶 A( 牛胰 ) 500 U
羧肽酶 B( 豬胰 ) 5 mg
羧肽酶 Y( 酵母 ) 1mg
T1 感受態(tài)細(xì)胞 10×100μL
T3 RNA 聚合酶 1000U
T3 RNA 聚合酶 10000U
T3 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒 50 次
T3 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒 50 次
T4 DNA 聚合酶 50U
T4 DNA 連接酶 1000U
T4 DNA 連接酶 200U
T4 RNA 連接酶 1000U
T4 RNA 連接酶 1 1000U
T4 RNA 連接酶 2( 截短型 ) 2000U
T4 RNA 連接酶 2( 截短型 K227Q) 2000U
T4 RNA 連接酶 2( 雙鏈 RNA 連接酶 ) 150UCitalopram (hydrobromide) (1 g)Bonitrile|Lu 10-171|Nitalapram|Prepram; 1-[3-(dimethylamino)propyl]-1-(4-fluorophenyl)-1,3-dihydro-5-isobenzofurancarbonitrile, monohydrobromide
Pyrazolam (10 mg)8-bromo-1-methyl-6-(2-pyridinyl)-4H-[1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]benzodiazepine
Ivacaftor (10 mg)Kalydeco|VX 770; N-
FG-4592 (50 mg)ASP1517|Roxadustat; N-[(4-hydroxy-1-methyl-7-phenoxy-3-isoquinolinyl)carbonyl]-glycine
YZ9 (100 mg)7-hydroxycoumarin-3-Carboxylic Acid ethyl ester; 7-hydroxy-2-ozo-2H-1-benzopyran-3-carboxylic acid, ethyl ester
Heat Shock Protein Inhibitor I (5 mg)HSP Inhibitor I|KNK 437; 3-(1,3-benzodioxol-5-ylmethylene)-2-oxo-1-pyrrolidinecarboxaldehyde
Apixaban (10 mg)BMS 562247-01|Eliquis; 4,5,6,7-tetrahydro-1-(4-methoxyphenyl)-7-oxo-6-[4-(2-oxo-1-piperidinyl)phenyl]-1H-pyrazolo[3,4-c]pyridine-3-carboxamide
L-Glutathione, oxidized (sodium salt) (250 mg)GSSG; L-g-glutamyl-L-cysteinyl-bimol-(2→2’)-disulfide-glycine, disodium salt
BAPTA-Acetoxymethyl ester (5 mg)BAPTA-AM; N,N’-[1,2-ethanediylbis(oxy-2,1-phenylene)]bis[N-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]-1,1’-bis[(acetyloxy)methyl] ester-glycine
Conoidin A (100 mg)2,3-bis(bromomethyl)-quinoxaline 1,4-dioxide
Δ9-THC (exempt preparation) (1 mg)NSC 134454|Δ9-Tetrahydrocannabinol; 6aR,7,8,10aR-tetrahydro-6,6,9-trimethyl-3-pentyl-6H-dibenzo[b,d]pyran-1-ol
Ivabradine (hydrochloride) (10 mg)S 16257; 3-[3-[[[(7S)-3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-yl]methyl]methylamino]propyl]-1,3,4,5-tetrahydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one, monohydrochloride
5-Cyano-2,3-di-(p-tolyl)tetrazolium (chloride) (50 mg)CTC|Cyanotolyl Tetrazolium Chloride; 5-cyano-2,3-bis(4-methylphenyl)-2H-tetrazolium, monochloride
T4 核酸內(nèi)切酶 V 2000U
T4 聚核苷酸激酶 200U
T4 噬菌體基因 32 蛋白 100μg
T4 噬菌體基因 32 蛋白 500μg