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詳細(xì)介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMYM價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMYM價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一成年女性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代；5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
組蛋白 3.1 小鼠單抗 30μL
組織培養(yǎng)基蛋白酶抑制劑 1mL
α- 淀粉酶 250g
α- 環(huán)狀糊精 250mg
α- 糜蛋白酶 1g
α －萘乙酸 5g
α- 氰基 -4- 羥基肉桂酸 10g
α- 乳糖 100g
α- 酮戊二酸 5g
α- 酮戊二酸鈉 5g
α2巨球蛋白 25Inh.U
α-Actin 小鼠單抗 1000μL
α-Actin 小鼠單抗 30μL10% Solution
Halochondrine A， Potassium Salt； OAOkadaic acid， Potassium Salt
4-（（5-Bromo-2-pyridinyl）amino）-4-oxobutanoic acid； Arabidopsis GSK-3 InhibitorBikinin
Aliskiren Hemifumarate； （2S，4S，5S，7S）-N-（2-Carbamoyl-2-methylpropyl）-5-amino-4-hydroxy-2，7-diisopropyl-8-[4-methoxy-3-（3-methoxypropoxy）phenyl]-oct* hemifumarateRenin Inhibitor
chloro[[2，EUK-124
3，4-Dihydro-3-methyl-4-oxoimidazo[5，1-d]-1，2，3，5-tetrazine-8-carboxamide； NSC 362856； CCRG 81045Temozolomide
1-[5-[（2，3-Dichlorophenyl）thio]-4-nitro-2-thienyl]ethanoneP5091
Sulfosuccinimidyl-2-（biotinamido）-ethyl-1，3’-dithiopropionate； Biotin disulfide N-Hydroxysulfosuccinimide esterSulfo-NHS-SS-Biotin
N-AGI-5198
（2R，4S）-ethyl 2-ethyl-4-（methoxycarbonyl）-6-（trifluoromethyl）-3，4-dihydroquinoline-1（2H）-carboxylate； CP-529414， CP529414， CP 529414Torcetrapib
4-Pyridinecarboxylic acid， 2-phenylhydrazide； NSC-14613PluriSIn 1
BerbenineBerbamine dihydrochloride
Methylenesuccinic acid； 2-Propene-1，2-dicarboxylic acidItaconic acid
N-（2-Aminophenyl）-4-[[[4-（3-pyridinyl）-2-pyrimidinyl]amino]methyl]benzamide； Mocetinostat； MG0103MGCD0103
2-（p-Methoxyphenyl）-α-2-piperidyl-4-quinolinemethanol dihydrochloride， NSC-23925， [2-（4-Methoxyphenyl）4-quinolinyl]-（piperidin-2-y）-methanol dihydrochlorideNSC-23925
α-Tubulin 小鼠單抗 1000μL
α-Tubulin 小鼠單抗 30μL
β- 氨基丙 1g
β- 半乳糖苷酶 5KU
β- 半乳糖苷酶檢測(cè)試劑盒 300 次
β- 淀粉酶 100g
β- 甘油磷酸二鈉鹽 10g
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