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EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0904價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0904價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一無精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人脈絡膜血管細胞*培養(yǎng)基100mL
腸道菌計數瓊脂/結晶紫中性紅膽鹽葡聚糖瓊脂/VRBDA腸道菌計數和腸桿菌科鑒別250克國產/進口
人鼻咽母系細胞英文名稱:CNE-2Z
抗生素Ⅷ號培養(yǎng)基/抗生素8號培養(yǎng)基/Antibiotic Agar NO.8去甲萬古霉素的效價測定250克國產/進口
大鼠腎小管上細胞*培養(yǎng)基100mL
去氧膽酸鹽瓊脂/脫氧膽酸鈉瓊脂/DCLA大腸菌群的平板測定以及腸道菌的選擇性培養(yǎng)250克國產/進口
Western Blot封閉液Ⅱ(奶粉,pH7.5)/Blocking Buffer(milk)100ml、500ml100ml、500ml
胰蛋白胨膽鹽瓊脂/Tryptone Bile Agar大腸桿菌的膜過濾法選擇性培養(yǎng)250克國產/進口
S180/小鼠腹水瘤株國產
KP-N-NS(人腎上腺神經母細胞瘤細胞(腦轉移))5×106cells/瓶×2
NCI-H520(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2gersion
U-2 OS(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
Lane Marker Loading Buffer(5x)/蛋白示蹤上樣緩沖液(非還原,5x)5ml5ml
Hela(人宮頸細胞)5×106cells/瓶×22C-T-2 (hydrochloride) (10 mg)4-(ethylthio)-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride; 2,5-Dimethoxy-4-ethylthiophenethylamine; 2C-T-2 (hydrochloride)
Prostaglandin B3 (50 ug)9-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,8(12),13E,17Z-tetraen-1-oic acid; PGB3; Prostaglandin B3
SR 3335 (5 mg)N-[4-[2,2,2-trifluoro-1-hydroxy-1-(trifluoromethyl)ethyl]phenyl]-2-thiophenesulfonamide; ML 176; SR 3335
Pterostilbene (50 mg)4-[(1E)-2-(3,5-dimethoxyphenyl)ethenyl)-phenol; 3’,5’-Dimethoxy-4-Stilbenol|trans-3,5-Dimethoxy-4’-Hydroxystilbene; Pterostilbene
2-(2-pyridyl)-4-methyl-Thiazole-5-Carboxylic Acid (1 g)4-methyl-2-(2-pyridinyl)-5-thiazolecarboxylic acid; 2-(2-pyridyl)-4-methyl-Thiazole-5-Carboxylic Acid
N-tridecanoyl-L-Homoserine lactone (10 mg)N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-tridec*; C13-HSL; N-tridecanoyl-L-Homoserine lactone
CAY10603 (1 mg)N-[4-[3-[[[7-(hydroxyamino)-7-oxoheptyl]amino]carbonyl]-5-isoxazolyl]phenyl]-1,1-dimethylethyl ester, carbamic acid; CAY10603
NSC 23766 (hydrochloride) (5 mg)N6-[2-[[4-(diethylamino)-1-methylbutyl]amino]-6-methyl-4-pyrimidinyl]-2-methyl-4,6-quinolinediamine, trihydrochloride; NSC 23766 (hydrochloride)
2,4-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid (500 mg)2,4-dimethyl-5-thiazolecarboxylic acid; 2,4-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid
FK-866 (50 mg)N-[4-(1-benzoyl-4-piperidinyl)butyl]-3-(3-pyridinyl)-2E-propenamide; K 22。175; FK-866
CGP 57380 (5 mg)N3-(4-fluorophenyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidine-3,4-diamine; MNK1 Inhibitor; CGP 57380
CAY10608 (5 mg)N-[4-[(2S)-3-[[2-(3,4-dichlorophenyl)ethyl]amino]-2-hydroxypropoxy]phenyl]-methanesulfonamide; CAY10608
改良淋病奈瑟菌選擇性瓊脂平板10塊國產/進口
NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion
人真微血管內細胞*培養(yǎng)基100mL