詳細(xì)介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
tetramethyl Nordihydroguaiaretic Acid (50 mg)4-[(2R,3S)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)-2,3-dimethylbutyl]-1,2-dimethoxy-benzene; tetramethyl NDGA|EM-1421|M4N|Tetrameprocol|TMNDGA; tetramethyl Nordihydroguaiaretic Acid
NS-398 (5 mg)N-[2-(cyclohexyloxy)-4-nitrophenyl]-methanesulfonamide; NS-398
U-75302 (500 ug)6-(6-(3R-hydroxy-1E,5Z-undecadien-1-yl)-2-pyridinyl)-1,5S-hexanediol; U-75302
Oleoyl Oxazolopyridine (5 mg)1-oxazolo[4,5-b]pyridin-2-yl-octadec-9Z-en-1-one; CAY1040Oleoyl Oxazolopyridine
Colorimetric COX Assay Arachidonic Acid (substrate) (1 ea)Arachidonic Acid (substrate); Colorimetric COX Assay Arachidonic Acid (substrate)
L-Thiocitrulline (hydrochloride) (100 mg)N5-(aminothioxomethyl)-L-ornithine (dihydrochloride); L-Thiocitrulline (hydrochloride)
YC-1 (5 mg)5-[1-(phenylmethyl)-1H-indazol-3-yl]-2-furanmethanol; YC-1
Sulpho NONOate (50 mg)disodium (E)-1-sulfonatodiazen-1-ium-1,2-diolate; Sulpho NONOate
Prostaglandin A1 methyl ester (1 mg)15S-hydroxy-9-oxo-prosta-10,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; PGA1 methyl ester; Prostaglandin A1 methyl ester
Prostaglandin E2-PEG11-biotin (100 ug)11α,15S-dihydroxy-9-oxo-prosta-52,13E-dien-1-oyl-polyethylene glycol 11-N’-biotinoyl-1,5-diaminopentane; PGE2-PEG11-biotin; Prostaglandin E2-PEG11-biotin
Stearoyl Serotonin (1 mg)N-[2-(5-hydroxy-1H-indol-3-yl)ethyl]-octadec*; Stearoyl Serotonin
3-Deazaadenosine (5 mg)1-β-D-ribofuranosyl-1H-Imidazo[4,5-c]pyridin-4-amine; deaza-Ado|DZA|c3Ado; 3-Deazaadenosine人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞英文名稱:C918
Hanks’平衡鹽/Hanks’ Balanced Salt solution細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)500毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
人胚膚成纖維樣細(xì)胞英文名稱:HES
YM瓊脂/YM Agar霉菌/酵母菌和耐酸菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人非小細(xì)胞肺細(xì)胞英文名稱:NCI-H1299
酵母浸出粉/酵母粉/干酵母/酵母提取物/酵母浸粉/酵母浸膏粉/酵母萃取物/酵母抽提物/Yeast extract powderBR250/500克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠雪旺氏細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
葡萄糖胰蛋白胨瓊脂/葡萄糖胰酪胨瓊脂/DTA培養(yǎng)基/Dextrose Tryptone Agar嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
成人真成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
亞利桑那菌瓊脂/SA瓊脂/Salmonella Arizona Agar亞利桑那沙門氏菌的選擇性分離250克國產(chǎn)/進(jìn)口
SK-MEL-1(人膚黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H446(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NIH3T3全細(xì)胞裂解液100μg100μggersion
C918(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Mammalian Protein Extraction Kit/哺動(dòng)物蛋白抽提試劑盒25次、100次國產(chǎn)
JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Hela S3(人宮頸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中華鱉脾來源細(xì)胞英文名稱:CSSTSP1
Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規(guī)格:3000次
小鼠畸胎瘤細(xì)胞英文名稱:F9
3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞
人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
AS-605240 (potassium salt) (1 mg)5-(6-quinoxalinylmethylene)-2,4-thiazolidinedione, monopotassium salt; AS-605240 (potassium salt)
JWH 398 7-chloronaphthyl isomer (1 mg)(7-chloronaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 398 7-chloronaphthyl isomer