詳細(xì)介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
Mebolazine (1 mg)Dimethazine|Roxilon; [(2α,5α,17β)-17β-hydroxy-2α,17-dimethylandrostan-3-ylidene]hydrazone, 17β-hydroxy-2α,17-dimethyl-androstan-3-one
Hydromorphone CRM (2 mL)Exalgo|Jurnista|NSC 19046|Novolaudon; 4,5α-epoxy-3-hydroxy-17-methyl-morphinan-6-one
Streptavidin:SureLight APC Protein Assay Format (1 mg)Streptavidin:SureLight APC Protein Assay Format
生物素標(biāo)記*基化組蛋白H3K4多肽Biotinylated Trimethyl Histone H3K4 Peptide (200 ul)
Z-DEVD-FMK, Caspase-3抑制劑(氟甲基酮)Caspase-3 Inhibitor Z-DEVD-FMK
Z-VAD-FMK, Caspase-Family抑制劑(氟甲基酮)Z-VAD-FMK
AZD-0530Saracatinib (AZD0530)
5-[(2-hydroxy-5,8-dihydronaphthalen-1-yl)methyl]-6-phenyl-2-thioxo-2,3-dihydropyrimidin-4(1H)-one; NSC-112546Cambinol
4-(Acetylamino)-N-(2-aminophenyl)benzamide, Acetyldinaline, GCI-994
蛋白酶抑制劑套裝II, EZBlockEZBlock Protease Inhibitor Cocktail II
FHRRIKAHeparin-Binding Peptide III
5-Pioglitazone
2-UNC0638
4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenyl-polyethylene glycol, t-Octylphenoxypolyethoxyethanol, Polyethylene glycol tert-octylphenyl etherTriton X-100, MegaPure Detergent, 10% Solution
T-47D(人腺管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SK-MEL-1(人膚黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
ProteinShow-G250蛋白快速染色試劑1000ml國產(chǎn)gersion
B16-F10(小鼠膚黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Molt-4(人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
P815(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HuH-7人肝細(xì)胞
C6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
eECL Western Blot Kit/高靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒250ml25ml、100ml、250ml
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞
ARPE-19(人視網(wǎng)膜上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:L1210
1640培養(yǎng)基/1640 Medium/RPMI 1640含L-谷氨酰胺,不含碳酸氫鈉10升國產(chǎn)/進(jìn)口
人食管細(xì)胞英文名稱:CaEs-17
MR-VP培養(yǎng)基/MR-VP試驗(yàn)用培養(yǎng)基/緩沖葡萄糖肉湯/葡萄糖磷酸鹽肉湯/MR VP Broth腸桿菌科細(xì)菌的甲基紅和VP試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人結(jié)直腸腺細(xì)胞英文名稱:HCT-15
蛋白胨/PeptoneBR250克國產(chǎn)/進(jìn)口
2-(3,4-Dimethoxybenzenesulfonylamino)-4-(3-Nitrophenyl)-5-(Piperidin-1-yl)MethylthiazoleJM6
3,4-Methylenedioxy-β-nitrostyreneMDBN
4-HNE4-Hydroxynonenal