EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞；KMY0926圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞；KMY0926圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法  1:2傳代；5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

小鼠腸動脈內(nèi)細胞*培養(yǎng)基100mL
Ampicillin(100mg/ml,1000X)規(guī)格：5*1ml
人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)細胞*培養(yǎng)基100mL
M-FC瓊脂/濾膜糞大腸菌瓊脂/M-FC Agar大腸桿菌群的濾膜法檢測250克國產(chǎn)/進口
人淋巴血管內(nèi)細胞*培養(yǎng)基100mL
大腸菌群顯色培養(yǎng)基/Coliform Chromogenic Medium快速準確檢測大腸菌群，大腸菌群培養(yǎng)24小時，顯蘭色1升國產(chǎn)/進口
貓腎上細胞英文名稱：CRFK
酪蛋白瓊脂/水解酪蛋白瓊脂/Casein Agar Medium用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗250克國產(chǎn)/進口
大鼠腎管狀上細胞*培養(yǎng)基100mL
糖蛋白胨培養(yǎng)液/糖蛋白胨肉湯/Lactose Peptone Broth飲用水中總大腸菌群多管發(fā)酵法檢驗250克國產(chǎn)/進口
UMR-106(大鼠骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
乙基紫疊氮鈉肉湯/EVA肉湯/EVA Broth用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
RN-c, 大鼠質(zhì)神經(jīng)元
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
NCI-H23(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
人直腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL抑肽素 APepstatin A
AP106AP106
DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 25 kDaDiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 25 kDa
15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2 Lipid Maps MS Standard (5 mg)15-deoxy-Δ12,14-PGJ2, 15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2 Lipid Maps MS Standard, 11-oxo-prosta-5Z,9,12E,14Z-tetraen-1-oic acid
8-iso-15-keto Prostaglandin F2β (5 mg)8-iso-15-keto Prostaglandin F2β, 9.beta.,11.alpha.-dihydroxy-15-oxo-(8.beta.)-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
15-S)-HETE Ethanolamide (500 ug)15(S)-HAEA, 15-S)-HETE Ethanolamide, 15(S)-hydroxy-N-(2-hydroxyethyl)-5Z,8Z,11Z,13E-eicosatetraenamide
MAM2201 N--4-hydroxypentyl) metabolite (5 mg)MAM2201 N--4-hydroxypentyl) metabolite, (1-(5-fluoro-4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)(4-methylnaphthalen-1-yl)methanone
15-keto Latanoprost (100 mg)15-keto Latanoprost, 9.alpha.,11.alpha.-dihydroxy-15-oxo-17-phenyl-18,19,2-trinor-prost-5Z-en-1-oic acid, isopropyl ester
D-myo-Inositol-1,3,4-triphosphate (sodium salt) (5 mg)Ins(1,3,4)-P3 (sodium salt)|1,3,4-IP3 (sodium salt), D-myo-Inositol-1,3,4-triphosphate, D-myo-inositol-1,3,4-tris(dihydrogen phosphate), trisodium salt
25I-NBOMe (hydrochloride) (5 mg)25I-NBOMe, 4-iodo-2,5-dimethoxy-N-[(2-methoxyphenyl)methyl]-benzeneethanamine, monohydrochloride
L-色氨酸（25GM）L-Tryptophan， CAS# 73-22-3； MW 204.23； USP
中國藍薔薇酸瓊脂250克國產(chǎn)/進口
Ca Ski(人宮頸上細胞)5×106cells/瓶×2
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞)5×106cells/瓶×2
MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion