詳細(xì)介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-16價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-16價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
SR 3335 (25 mg)N-[4-[2,2,2-trifluoro-1-hydroxy-1-(trifluoromethyl)ethyl]phenyl]-2-thiophenesulfonamide; ML 176; SR 3335
Pterostilbene (250 mg)4-[(1E)-2-(3,5-dimethoxyphenyl)ethenyl)-phenol; 3’,5’-Dimethoxy-4-Stilbenol|trans-3,5-Dimethoxy-4’-Hydroxystilbene; Pterostilbene
2-(2-pyridyl)-4-methyl-Thiazole-5-Carboxylic Acid (500 mg)4-methyl-2-(2-pyridinyl)-5-thiazolecarboxylic acid; 2-(2-pyridyl)-4-methyl-Thiazole-5-Carboxylic Acid
Δ17-Prostaglandin E1 (50 mg)9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-prosta-13E,17Z-dien-1-oic acid; 5,6-dihydro PGE3|Δ17-PGE1; Δ17-Prostaglandin E1
AGK2 (5 mg)2-cyano-3-[5-(2,5-dichlorophenyl)-2-furanyl]-N-5-quinolinyl-2-propenamide; AGK2
NSC 23766 (hydrochloride) (25 mg)N6-[2-[[4-(diethylamino)-1-methylbutyl]amino]-6-methyl-4-pyrimidinyl]-2-methyl-4,6-quinolinediamine, trihydrochloride; NSC 23766 (hydrochloride)
2,4-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid (250 mg)2,4-dimethyl-5-thiazolecarboxylic acid; 2,4-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid
FK-866 (5 mg)N-[4-(1-benzoyl-4-piperidinyl)butyl]-3-(3-pyridinyl)-2E-propenamide; K 22。175; FK-866
CGP 57380 (25 mg)N3-(4-fluorophenyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidine-3,4-diamine; MNK1 Inhibitor; CGP 57380
CAY10608 (25 mg)N-[4-[(2S)-3-[[2-(3,4-dichlorophenyl)ethyl]amino]-2-hydroxypropoxy]phenyl]-methanesulfonamide; CAY10608
胰胨大豆胨固綠瓊脂/胰蛋白胨大豆快綠瓊脂/胰蛋白胨大豆固綠瓊脂/Tryptic Soy Fast Green Agar濾膜細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
RTE(大鼠氣管上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H446(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
TF-1(人血液白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
L Wnt-3A(小鼠下結(jié)締組織細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)細(xì)胞
U14(小鼠子宮頸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
1.5M Tris-Cl(pH8.8)500ml國(guó)產(chǎn)
SHZ-88(大鼠腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
DLD-1(人結(jié)腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
GH3, 大鼠垂體生長(zhǎng)激素腺瘤
小鼠小腸隱窩上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
BGC-803(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱(chēng):raw264.7
中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)規(guī)格:100ml
Apelin-13 (5 mg)L-glutaminyl-L-arginyl-L-prolyl-L-arginyl-L-leucyl-L-seryl-L-histidyl-L-lysylglycyl-L-prolyl-L-methionyl-L-prolyl-L-phenylalanine; Apelin-13
CAY10614 (5 mg)N-cyclopentyl-N,N-dimethyl-3,4-bis(tetradecyloxy)-benzenemethanaminium, iodide; CAY10614
ABT-869 (5 mg)N-[4-(3-amiH-indazol-4-yl)phenyl]-N’-(2-fluoro-5-methylphenyl)-urea; Linifanib; ABT-869