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          BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞;BNL 1ME A.7R.1圖片

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          • 品牌 ATCC
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-01-11 09:17:07瀏覽次數(shù):390

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞;BNL 1ME A.7R.1圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

          詳細(xì)介紹

          BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞;BNL 1ME A.7R.1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
          細(xì)胞名稱 BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞;BNL 1ME A.7R.1圖片
          形態(tài)特性  上皮樣
          生長特性 貼壁生長
          特征特性  該細(xì)胞由正常肝上皮細(xì)胞BNL CL.2經(jīng)甲基膽蒽誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化而建立,在0.3%的瓊脂中可生長,鼠痘病毒陰性。 
          培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
          傳代方法  1:3~1:8傳代,每周2~3次換液。
          傳代情況 P14
          凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
          支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
          STR  -
          同工酶 
          染色體 
          使用權(quán)限 A類
          細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
          1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
          2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
          3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
          二、細(xì)胞處理:
          1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
          2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
          2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
          3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
          4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
          質(zhì)量保證:    
          我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
          操作步驟:
          1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
          2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

          mRNA 提取試劑盒25 次
          藍(lán)膠瓊脂糖50mL
          130647-200尿嘧啶糖基化酶抑制劑200U
          120630-25Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL
          TB1 菌種1mL
          碘硝基四唑紫嘌呤250mg
          青鏈溶液100mL
          螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒100 次
          131086-2辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素2mg
          140590-15核苷酸類似物法易錯(cuò) PCR 試劑盒15 次
          脫落酸25mg
          反玉米素50mg兔子蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人組織蛋白去乙?;?HD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人胰島細(xì)胞抗體(ICA)Elisa試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人腺毒IgM(ADV-IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人傷寒抗原(St-Ag)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人前列腺干細(xì)胞抗原(PSCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人內(nèi)毒素(ET)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人磷酸肌酸激酶(CPK)Elisa試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人顆粒溶素(granulysin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          人睪酮(T)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
          琥珀酸 ( 丁二酸 )25g
          Protein G 磁珠1mL
          CAS9037-22-3支鏈淀粉1g
          60603-20即用型藍(lán)白 T 載體 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次
          顯影粉1袋

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