詳細(xì)介紹
小鼠T淋巴瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng) 小鼠T淋巴瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞1988年建系,源自C57BL/6 (H-2 b)小鼠的經(jīng)電轉(zhuǎn)質(zhì)粒 pAc-neo-OVA的淋巴細(xì)胞系EL4。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;0.05 mM 2-mercaptoethanol +0.4 mg/ml G418
傳代方法 細(xì)胞密度保持在1×105~1×106 cells/ml,每周換液2~3次
傳代情況 C1
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Metanephrine (5 mg)4-hydroxy-3-methoxy-α-[(methylamino)methyl]-benzenemethanol
JWH 019 N-(4-fluorohexyl) isomer (500 ug)JWH 019 N-(4-fluorohexyl) analog; (1-(4-fluorohexyl)-1H-indol-3-yl)(naphthalen-1-yl)methanone
Lorcaserin (hydrochloride) (10 mg)APD356|Belviq; 8-chloro-2,3,4,5-tetrahydro-1R-methyl-1H-3-benzazepine, monohydrochloride
Formoterol (hemifumarate) (50 mg)CGP 25827A|Foradil|NSC 299587|YM-08316; rel-N-[2-hydroxy-5-[(1R)-1-hydroxy-2-[[(1R)-2-(4-methoxyphenyl)-1-methylethyl]amino]ethyl]phenyl]-formamide, hemifumarate
Pelitinib (5 mg)EKB-569; N-[4-[(3-chloro-4-fluorophenyl)amino]-3-cyano-7-ethoxy-6-quinolinyl]-4-(dimethylamino)-2E-butenamide
Keracyanin (chloride) (1 mg)Cyanidin 3-rutinoside|Meralop|Sambucin; 3-[[6-O-(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]oxy]-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-1-benzopyrylium, monochloride
Nortriptyline (hydrochloride) (10 mg)Acetexa|Pamelor; 3-(10,11-dihydro-5H-dibenzo[a,d]cyclohepten-5-ylidene)-N-methyl-1-propanamine, monohydrochloride
MMP Inhibitor II (10 mg)Matrix Metalloproteinase Inhibitor II|NHDDPC|PG 117025|PGE 4410186; hexahydro-N-hydroxy-1,3-bis[(4-methoxyphenyl)sulfonyl]-5,5-dimethyl-2-pyrimidinecarboxamide
5-chloro NNEI (5 mg)5-chloro MN-24; 1-(5-chloropentyl)-N-(naphthalen-1-yl)-1H-indole-3-carboxamide
Meropenem (100 mg)ICI 194660|Merrem I.V.|SM 7338; (4R,
5-Octyl D-glutamate (10 mg)5-Octyl ester D-glutamatic acid; 5-octyl ester D-glutamic acid人布抗體(Brucellosis-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人17羥孕酮(17-OHP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛支原體ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
猴子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠25羥維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
Kanamycin A (5 g)O-
Citrulline-specific Probe (250 ug)Rh-PG|Rhodamine Phenylglyoxal; 3’,6’-bis(dimethylamino)-3-oxo-N-((1-(1-oxo-1-((3-(2-oxoacetyl)phenyl)amino)propan-2-yl)-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)-3H-spiro[isobenzofuran-1,9’-xanthene]-5-carboxamide hydrate
ABT-199 (1 mg)GDC 0199; 4-