抗丙型肝炎病毒膜區(qū)抗原單克隆抗體雜交瘤細胞株；HCVEA-246圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 抗丙型肝炎病毒膜區(qū)抗原單克隆抗體雜交瘤細胞株；HCVEA-246圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性  可產(chǎn)生抗丙型肝炎病毒墨區(qū)抗原的單克隆抗體。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  新生牛血清，10%
傳代方法  1：4-1：8
傳代情況 
凍存條件  基礎培養(yǎng)液+20%牛血清+10%DMSO
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

（±）-Octanoylcarnitine chloride （50 mg）3-carboxy-N，N，N-trimethyl-2-[（1-oxooctyl）oxy]-1-propanaminium， monochloride； （±）-Octanoylcarnitine chloride
（±）8-HETE （25 ug）（±）8-hydroxy-5Z，9E，11Z，14Z-eicosatetraenoic acid； （±）8-HETE
（±）-Flurbiprofen （25 g）（±）-2-fluoro-α-methyl-[1，1’-biphenyl]-4-acetic acid； Ansaid； （±）-Flurbiprofen
Glimepiride （5 g）Amaryl|Glista OD； 3-ethyl-2,5-dihydro-4-methyl-N-[2-[4-[[[[（trans-4-methylcyclohexyl）amino]carbonyl]amino]sulfonyl]phenyl]ethyl]-2-oxo-1H-pyrrole-1-carboxamide
Bromosporine （10 mg）ethyl （3-methyl-6-（4-methyl-3-（methylsulfonamido）phenyl）-[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-8-yl）carbamate
NMDA （250 mg）N-Methyl-D-Aspartic Acid； N-methyl-D-aspartic acid
25N-NBOMe （hydrochloride） （50 mg）2；C-N-NBOMe； 2-（2,5-dimethoxy-4-nitrophenyl）-N-（2-methoxybenzyl）ethanamine, monohydrochloride
SDB-006 （1 mg）1-pentyl-N-（phenylmethyl）-1H-indole-3-carboxamide
Minoxidil （500 mg）Loniten|U-10858； 6-（1-piperidinyl）-2,4-pyrimidinediamine 3-oxide
Harringtonine （5 mg）NSC 124147； 3-
AZD 5363 （10 mg）4-amino-N-[（1S）-1-（4-chlorophenyl）-3-hydroxypropyl]-1-（7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl）-4-piperidinecarboxamide
JWH 019 N-（2-fluorohexyl） isomer （1 mg）JWH 019 N-（2-fluorohexyl） analog； （1-（2-fluorohexyl）-1H-indol-3-yl）（naphthalen-1-yl）methanoneUCL-032IBRS-2豬腎傳代細胞1×1061ml/T751400 元
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