詳細(xì)介紹
小鼠纖維肉瘤細(xì)胞;WEHI-13VAR圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠纖維肉瘤細(xì)胞;WEHI-13VAR圖片
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁及懸浮生長(zhǎng)
特征特性 在放線菌素D存在下對(duì)TNF敏感
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 新生牛血清,10%
傳代方法 1:4-1:6
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
(2R,3R,4S,5R)-5-(6-amino-2-chloro-9H-purin-9-yl)-4-fluoro-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-olClofarabine
2H-Pyrido[1’,2’:4,5]pyrazino[2,1-b][1,3]oxazine-9-carboxamide, N-[(2,4-difluorophenyl)methyl]-3,4,6,8,12,12a-hexahydro-7-hydroxy-4-methyl-6,8-dioxo-, (4R,12aS)-GSK1349572
(2R,3R,4R,5S)-1-(2-Hydroxyethyl)-2-(-(hydroxymethyl)piperidine-3,4,5-triol; N-(2-Hydroxyethyl)-1-deoxynojirimycin; BAY-1099Miglitol
(S)-4-methyl-N-((S)-1-((S)-4-methyl-1-((R)-2-methyloxiran-2-yl)-1-oxopentan-2-ylamino)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl)-2-((S)-2-(2-morpholinoacetamido)-4-phenylbutanamido)pent*; PR-171Carfilzomib
1-Daminozide
4-[[4-Oxo-2-thioxo-3-[3-trifluoromethyl)phenyl]-5-thiazolidinylidene]methyl]benzoic acid; CFTR(inh)-172CFTR Inhibitor-172
2-Amino-8-ethyl-4-methyl-6-(lH-pyrazol-5-yl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one; SAR245409XL765
(S)-N-(4-(2-((4-morpholinophenyl)amino)pyrimidin-4-yl)phenyl)pyrrolidine-2-carboxamideXL019
2,3,4,5-Tetrahydro-7-hydroxy-1H-benzofuro[2,3-c]azepin-1-oneCID-755673
(2R,Phleomycin
Annexin V-PE-Cy5 ReagentAnnexin V-PE-Cy5 Reagent
Protein A-AgaroseHi-Bind Protein A-AgaroseHGACL-009Hs578T人乳腺癌細(xì)胞1×1061ml/T751050 元
HRCL-005HLF-a人肺細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
EMCL-002UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細(xì)胞1×1061ml/T751400 元
HEMCL-015HFTF人胚胎眼Tenon囊成纖維細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
HICL-001TE353.SK人正常皮膚細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
HIMCL-056KG-1a人急性骨髓白血病細(xì)胞1×1061ml/T751400 元
HRCL-015NCI-H2227人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
ICL-002GP-S2豚鼠皮質(zhì)細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
ICL-037TS-ES-1樹鼩胎皮成纖維樣細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
MIMCL-012P388D1(IL-1)小鼠淋巴瘤細(xì)胞1×1061ml/T751000 元
RCL-022OAR-L1綿羊肺細(xì)胞1×1061ml/T751200 元
UCL-028CRFK貓腎細(xì)胞1×1061ml/T751400 元
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WHB-500WHB 真空式過(guò)濾器500ml真空式過(guò)濾器,PES(聚醚砜)膜,0.22um孔徑,滅菌材質(zhì)PS1個(gè)/包,12個(gè)/箱詢價(jià) 元
WHB-CCF25-1-CC培養(yǎng)瓶膠原包被25cm2培養(yǎng)瓶50ml透氣蓋滅菌5個(gè)/包,50個(gè)/盒詢價(jià) 元
WHB-MCE-0.22-30WHB 一次性針頭式過(guò)濾器直徑30mm針頭式過(guò)濾器,MCE膜,0.22um膜孔徑,黃色,滅菌材質(zhì)PP40個(gè)/盒,320個(gè)/箱詢價(jià) 元
HUM- iCell -e009臍靜脈平滑肌細(xì)胞1×1063892 元5×1067185 元