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小鼠骨髓纖維原細胞;M2-10B4價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
小鼠骨髓纖維原細胞;M2-10B4價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是CJ Eaves從(C57BL/6JX C3H/HeJ)F1小鼠的骨髓基質(zhì)中分離建立的。M2-10B4表達層粘連蛋白和膠原蛋白IV,但并不表達膠原蛋白I。在長期培養(yǎng)體系中該細胞支持人或鼠的骨髓組織生成。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
1,2-Dilauroyl-sn-glycerol (100 mg)1,1’-[(1S)-1-(hydroxymethyl)-1,2-ethanediyl]ester-dodecanoic acid; 1,2-DLG; 1,2-Dilauroyl-sn-glycerol
1-O-Octadecyl-2-O-methyl-sn-glycerol (100 mg)2S-methoxy-3-(octadecyloxy)-1-propanol; PIA 7|2-Methyl-1-octadecyl-sn-glycerol; 1-O-Octadecyl-2-O-methyl-sn-glycerol
Cdk2 Inhibitor II (500 ug)4-[2-(5-bromo-1,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidene)hydrazinyl]-benzenesulfonamide; Cyclin-Dependent Kinase 2 Inhibitor II|SC-221409; Cdk2 Inhibitor II
ML-335 (25 mg)1-[[4-(acetylamino)phenyl]methyl]-4-(2-phenylethyl)-4-piperidinecarboxylic acid, ethyl ester; CYM 51010|CID-23723457; ML-335
Q-VD-OPH (5 mg)(3S)
BRM bromodomain Ligand/APC Acceptor Mixture (420 wells)BRM bromodomain Ligand/APC Acceptor Mixture
MAM2201 (25 mg)[1-(5-fluoropentyl)-1H-indol-3-yl](4-methyl-1-naphthalenyl)-methanone; AM2201 4-methylnaphthyl analog|JWH 122 N-(5-fluoropentyl) analog; MAM2201
Palmiaidic Acid (100 mg)(9E)-hexadecenoic acid; 9-trans-Hexadecenoic acid; Palmiaidic Acid
Icilin (100 mg)AG 3-5; 3,6-dihydro-1-(2-hydroxyphenyl)-4-(3-nitrophenyl)-2(1H)-pyrimidinone
17(18)-EpETE (25 ug)(±)17(18)-epoxy-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; 17,18-epoxy Eicosatetraenoic Acid|17,18 EEQ; 17(18)-EpETE
FABP4 Inhibitor (1 mg)A-FABP Inhibitor|ALBP Inhibitor|Adipocyte FABP Inhibitor|BMS 309403|Fatty Acid Binding Protein 4 Inhibitor|aP2 Inhibitor; 2-[[2’-(5-ethyl-3,4-diphenyl-1H-pyrazol-1-yl)[1,1’-biphenyl]-3-yl]oxy]-acetic acid
UNC0631 (5 mg)N-[1-(cyclohexylmethyl)-4-piperidinyl]-2-[hexahydro-4-(1-methylethyl)-1H-1,4-diazepin-1-yl]-6-methoxy-7-[3-(1-piperidinyl)propoxy] 4-quinazolinamine
50 次 雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 488·PI)
10μL HRP 標記的抗生物素抗體
5g 葉酸
10mL 弗氏不*佐劑
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷 CAS114162-64-0 5mg
色素細胞生長因子 - 不含 TPA 21-0090-5 5mL
一管式拭子 DNAout 60501-20 20 次
1000U RecJf 核酸外切酶
0.4mL Deaza dGTP
5次 96 孔板病毒 RNAout( 離心法 )
2000U T4 核酸內(nèi)切酶 V
亮綠 CAS633-03-4 5g
SMD1163 酵母菌種 12-216 1mL
30 次 一站式 CTAB-PAGE 電泳套裝
10 次 克必隆 eTS miRNA RT-PCR 試劑盒
100mL 吐溫 -20
500mL McCoy's5A 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )
100mL DNA Tris HCl,1M,pH7.0
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC·PI) 81025-50 50 次
DNA 電泳分子量標準 (3)pUC19/MspI 90602C-50 50 次
20L 濕法電轉(zhuǎn)液 ( 干粉 )
1g 丁酸
5g 溴酚藍
400μL 乙?;Q灏椎鞍?nbsp;
L- 亮氨酸 CAS61-90-5 25g
抑氨肽酶,5mg/mL 130536-5 5mL
50 次 柱式骨骼 DNAout
(±)-CP 47,497 (solution) (5 mg)rel-2-[(1S,3R)-3-hydroxycyclohexyl]-5-(2-methyloctan-2-yl)-phenol; CP 47,947; (±)-CP 47,497 (solution)
9(R)-HETE (50 ug)9R-hydroxy-5Z,7E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; 9(R)-HETE
FeTMPyP (50 mg)Fe(III)tetrakis (1-methyl-4-pyridyl) porphyrin pentachlorideporphyrin pentachloride; FeTMPyP