詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞;HB NI8價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細胞;HB NI8價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C10
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
100mL β- 乙醇
1g 魯米諾
次(亞)甲基蘭 CAS7220-79-3 10g
L- 谷胱甘肽 ( 還原型 ) 120705-5 5g
1g 支鏈淀粉
1g 苦杏仁苷
250g 磷酸二氫
10×100μL EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞
D- 核糖 CAS50-69-1 5g
β- 乙醇,蛋白 131052-10 10mL
50 次 柱式土壤 RNAout
10U 磷酸二酯酶Ⅱ
1套 CN/DAB 底物套裝
100 次 糞便 DNAout
2mL 環(huán)氧基磁珠
環(huán)介導等溫擴增技術服務 D025-1 一個基因
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細胞 121004-10 0.1mL×10
100μL 小鼠抗 S1 標簽單抗
5g 甲苯胺藍
5g β- 環(huán)狀糊精
96 支 10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 ) GIMAP7 GTP酶IMAP家族成員7抗體 規(guī)格:0.2ml
LRRC41 LRRC41蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
phospho-ATF2 (Thr53) 磷酸化活化復制因子2抗體 規(guī)格:0.1ml
Coronin 1a 肌動蛋白結合蛋白CORO1A抗體 規(guī)格:0.2ml
phospho-PRKCQ(Ser695) 磷酸化蛋白激酶C theta抗體 規(guī)格:0.1ml
FBXO4 FBXO4蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
Repetin 中間絲相關蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
PACRG 麻瘋病和帕金森氏病共同調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
MID1/Midline-1/RNF59 環(huán)指蛋白59抗體 規(guī)格:0.2ml
Myocardin 促管平滑肌細胞分化因子抗體 規(guī)格:0.2ml
LMBR1/DIF14 分化相關基因14抗體 規(guī)格:0.2ml
APNG/MPG N-甲基嘌呤DNA糖基化酶 規(guī)格:0.2ml
ANGEL1 ANGEL1蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
C3orf23 3號染色體開放閱讀框23抗體 規(guī)格:0.2ml
Orosomucoid 2 類粘蛋白2抗體 規(guī)格:0.2ml
Chondroitin Sulfate 硫酸軟骨素抗體 規(guī)格:0.2ml
OLFM3/Optimedin 嗅球蛋白3抗體 規(guī)格:0.2ml
PCDHB5 原鈣粘蛋白β5抗體 規(guī)格:0.2ml
Phospho-p53BP1 (Ser1778) 磷酸化p53結合蛋白1抗體 規(guī)格:0.1ml
ATP citrate lyase/ACLY 三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體 規(guī)格:0.2ml
Salmonella tropina 沙門氏菌菌體蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml