詳細(xì)介紹
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??;L-929 [L929]說(shuō)明書(shū)【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 親本L的亞克隆,是zui早建立的連續(xù)培養(yǎng)物之一,L細(xì)胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下網(wǎng)眼狀空隙和脂肪組織。APRT+,HPRT+。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體 56-68
使用權(quán)限 A類(lèi)
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??;L-929 [L929]說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??;L-929 [L929]說(shuō)明書(shū)質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??;L-929 [L929]說(shuō)明書(shū)操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
大鼠淋巴細(xì)胞試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠淋巴細(xì)胞試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠淋巴細(xì)胞試劑盒、大鼠淋巴細(xì)胞eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠活化A受體抗體試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠活化A受體抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠活化A受體抗體試劑盒、大鼠活化A受體抗體eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠抗平滑肌抗體試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠抗平滑肌抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠抗平滑肌抗體試劑盒、大鼠抗平滑肌抗體eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠疊氮胸苷試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠疊氮胸苷試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠疊氮胸苷試劑盒、大鼠疊氮胸苷eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠單核細(xì)胞趨化1試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠單核細(xì)胞趨化1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠單核細(xì)胞趨化1試劑盒、大鼠單核細(xì)胞趨化1eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠叉頭P3試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠叉頭P3試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠叉頭P3試劑盒、大鼠叉頭P3eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。5(6)-TRITC 10mg 22-0020-10
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝帶芯長(zhǎng)尖 ) 1000 支 17-007-1000
1mL Protein G 瓊脂糖
100mL Bradford 法蛋白定量試劑盒
100μL Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 )
5次 植物線(xiàn)粒體純化試劑盒 ( 精提 )
Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活劑 ) 1mg 23-0600-1
玻璃珠法柱式酵母 DNAout 50 次 130992-50
400U RNase 抑制劑 ( 人源 )
100mL 超雜交液 A(不含甲酰胺)
1g 鹽酸四環(huán)素干粉
1mL 環(huán)孢 A 溶液 ,10mg/mL
ONPG 溶液,10mg/mL 10mL 131185-10
DNA CTAB 溶液,20% 100mL 101107-100
10 次 Southern 植物 DNAout
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克?。籐-929 [L929]說(shuō)明書(shū)100mL DMEM 培養(yǎng)基 ( 高糖,含 10% 胎牛血清 )
50 次 柱式真菌 DNAout
1mL ER2566 菌種
克必隆 eTS 細(xì)菌基因組差減雜交試劑盒 7次 130410-7
96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 ) 1次 80919-1
25g 水楊酸
200mL 大鼠中性粒細(xì)胞分離液 1.091