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          小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??;L-929 L929說(shuō)明書(shū)

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          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 型號(hào)
          • 品牌 ATCC
          • 廠(chǎng)商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-01-20 13:24:47瀏覽次數(shù):443

          聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]說(shuō)明書(shū)采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

          詳細(xì)介紹

          小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??;L-929 [L929]說(shuō)明書(shū)【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。

          細(xì)胞名稱(chēng)小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]說(shuō)明書(shū)
          形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
          生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
          特征特性  親本L的亞克隆,是zui早建立的連續(xù)培養(yǎng)物之一,L細(xì)胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下網(wǎng)眼狀空隙和脂肪組織。APRT+,HPRT+。 
          培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
          傳代方法  1:3傳代;3-4天一次
          傳代情況 PN3
          凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
          支原體檢測(cè) 熒光法(-)
          STR  -
          同工酶 
          染色體  56-68
          使用權(quán)限 A類(lèi)

          小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??;L-929 [L929]說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
          1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
          2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
          3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
          二、細(xì)胞處理:
          1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
          2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
          2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
          3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
          4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
          小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??;L-929 [L929]說(shuō)明書(shū)質(zhì)量保證:    
          我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
          小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??;L-929 [L929]說(shuō)明書(shū)操作步驟:
          1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
          2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

          大鼠淋巴細(xì)胞試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠淋巴細(xì)胞試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠淋巴細(xì)胞試劑盒、大鼠淋巴細(xì)胞eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
          大鼠活化A受體抗體試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠活化A受體抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠活化A受體抗體試劑盒、大鼠活化A受體抗體eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
          大鼠抗平滑肌抗體試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠抗平滑肌抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠抗平滑肌抗體試劑盒、大鼠抗平滑肌抗體eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
          大鼠疊氮胸苷試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠疊氮胸苷試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠疊氮胸苷試劑盒、大鼠疊氮胸苷eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
          大鼠單核細(xì)胞趨化1試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠單核細(xì)胞趨化1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠單核細(xì)胞趨化1試劑盒、大鼠單核細(xì)胞趨化1eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
          大鼠叉頭P3試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠叉頭P3試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠叉頭P3試劑盒、大鼠叉頭P3eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。5(6)-TRITC    10mg    22-0020-10
          10 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝帶芯長(zhǎng)尖 )    1000 支    17-007-1000
          1mL        Protein G 瓊脂糖
          100mL        Bradford 法蛋白定量試劑盒
          100μL        Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 )
          5次        植物線(xiàn)粒體純化試劑盒 ( 精提 )
          Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活劑 )     1mg    23-0600-1
          玻璃珠法柱式酵母 DNAout    50 次    130992-50
          400U        RNase 抑制劑 ( 人源 )
          100mL        超雜交液 A(不含甲酰胺)
          1g        鹽酸四環(huán)素干粉
          1mL        環(huán)孢 A 溶液 ,10mg/mL
          ONPG 溶液,10mg/mL    10mL    131185-10
          DNA  CTAB 溶液,20%    100mL    101107-100
          10 次        Southern 植物 DNAout 
          小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克?。籐-929 [L929]說(shuō)明書(shū)100mL        DMEM 培養(yǎng)基 ( 高糖,含 10% 胎牛血清 )
          50 次        柱式真菌 DNAout
          1mL        ER2566 菌種
          克必隆 eTS 細(xì)菌基因組差減雜交試劑盒    7次    130410-7
          96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 )    1次    80919-1
          25g        水楊酸
          200mL        大鼠中性粒細(xì)胞分離液 1.091

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