詳細(xì)介紹
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]圖片
形態(tài)特性 巨噬細(xì)胞
生長特性 半貼壁生長
特征特性 NR8383 (正常大鼠,1983年8月3日)來源于肺灌洗時(shí)的正常大鼠肺泡巨噬細(xì)胞。 細(xì)胞在gerbil肺細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約8-9個(gè)月。 隨后,不再需要外源生長因子。 通過有限稀釋法從單個(gè)細(xì)胞克隆并亞克隆NR8383細(xì)胞,并三次用軟瓊脂亞克隆。 細(xì)胞表現(xiàn)出巨噬細(xì)胞的特性,吞噬酵母多糖和銅綠,非特異性脂酶活性,F(xiàn)c受體,氧化降解;分泌IL-1, TNF beta和IL-6,可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子。 NR8383細(xì)胞響應(yīng)博萊霉素,分泌TGF beta前體。
培養(yǎng)條件 F12K 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,20%
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]圖片質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]圖片操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
豚鼠特異性免疫球E試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T豚鼠特異性免疫球E試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠特異性免疫球E試劑盒、豚鼠特異性免疫球Eeisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠6酮前列腺試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T小鼠6酮前列腺試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠6酮前列腺試劑盒、小鼠6酮前列腺eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠骨保護(hù)配體試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T小鼠骨保護(hù)配體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠骨保護(hù)配體試劑盒、小鼠骨保護(hù)配體eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠淀試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T小鼠淀試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠淀試劑盒、小鼠淀eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠磷肌醇3激酶試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T小鼠磷肌醇3激酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠磷肌醇3激酶試劑盒、小鼠磷肌醇3激酶eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物試劑盒、大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠免疫球E試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T大鼠免疫球E試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠免疫球E試劑盒、大鼠免疫球Eeisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。1g 熒光增白劑 28
50 次 菌落 PCR 試劑盒 2.0
1g 黃嘌呤
2mL CTP 溶液,2.5mM
植物血球凝集素 P CAS9008-97-3 5mg
重組蛋白 G 131080-1 1mg
50 次 柱式 DNA 膠回收試劑盒
500U Long-Taq DNA 聚合酶
5g 木瓜蛋白酶
50 次 Caspase 2 檢測試劑盒
噻唑蘭 CAS298-93-1 250mg
質(zhì)譜兼容型蛋白銀染試劑盒 100811-10 10 次
300 次 β- 半乳糖苷酶檢測試劑盒
0.1 mL×10 M15 感受態(tài)細(xì)胞
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]圖片5g 傘形酮
24 T 乳酸脫氫酶測試盒
100μL 兔抗 His 標(biāo)簽多抗,HRP 標(biāo)記
多聚甲醛 - 氫氧化固定液 131283-250 250 mL
柱式病毒 RNAout 71001-50 50 次
100 次 鳥類種屬鑒定 PCR Mix