詳細(xì)介紹
大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可誘導(dǎo)產(chǎn)生芳烴羥化酶,用于檢測(cè)環(huán)境樣品或食物提取物中皮克級(jí)的多氯聯(lián)苯有機(jī)化合物。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C147
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
兔子Ⅰ型前膠原羧基端試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T兔子Ⅰ型前膠原羧基端試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子Ⅰ型前膠原羧基端試劑盒、兔子Ⅰ型前膠原羧基端elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)3試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)3試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)3試劑盒、兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)3 elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子膠原酶I試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T兔子膠原酶I試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子膠原酶I試劑盒、兔子膠原酶I elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔胎盤生長(zhǎng)試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T兔胎盤生長(zhǎng)試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔胎盤生長(zhǎng)試劑盒、兔胎盤生長(zhǎng)elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
15ku 半纖維素酶
0.1mg Staurosporine(PKC 抑制劑 )
500U 堿性磷酸酶,牛小腸
Tocopherol( 抗氧化劑 ) 23-0780-2 2g
大提柱式細(xì)菌 DNAout( 含溶菌酶 ) 80927B-4 4次
10mL RNase-free 水
25 T 超微量 ATP 酶測(cè)試盒 ( 測(cè) Ca2+Mg2+ATPase)
50mL 通用洗柱液
250 次 柱式凍存血液 DNAout
超微量 ATP 酶測(cè)試盒 ( 測(cè) Ca2+ATPase) 18-0150-25 25 T
DNA Guanidine HCl( 鹽酸胍 ) 101212-100 100g
100U Sulfolobus DNA 聚合酶 IV
50 次 DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (250-1500 bp)
50 次 柱式動(dòng)物 RNAout
1mL SG1117 菌種
Red-Tth DNA 聚合酶 130836-250 250U
柱式 DNA 膠回收試劑盒 60202-100 100 次
10g 酸洗玻璃珠系列
4次 大提柱式植物 DNAout
1mL SDS-PAGE 上樣液,5×
30μL α-Actin 小鼠單抗
核酸內(nèi)切酶 IV 130638-1000 1000U
PCR 優(yōu)化試劑盒 100844-1 1套人周期依賴性激酶4試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人周期依賴性激酶4試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人周期依賴性激酶4試劑盒、人周期依賴性激酶4 elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人脂a試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人脂a試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂a試劑盒、人脂a elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
人異質(zhì)型核核復(fù)合物試劑盒規(guī)格型號(hào):96T/48T人異質(zhì)型核核復(fù)合物試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人異質(zhì)型核核復(fù)合物試劑盒、人異質(zhì)型核核復(fù)合物elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。