大鼠骨髓瘤細胞；Y3-Ag 1.2.3圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 大鼠骨髓瘤細胞；Y3-Ag 1.2.3圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  這是C. Milstein建立的骨髓瘤細胞株S210的衍生株。 未經(jīng)C. Milstein同意不得銷售或提供給第三方。 這株細胞具8-氮鳥嘌呤抗性，HAT敏感，可與大鼠B細胞融合大鼠-大鼠雜交瘤。 檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  維持細胞濃度在1×105~2×106cells/ml。
傳代情況 PN5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

小鼠一氧化氮合成酶試劑盒規(guī)格型號：96T/48T小鼠一氧化氮合成酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠一氧化氮合成酶試劑盒、小鼠一氧化氮合成酶eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
小鼠磷脂酶試劑盒規(guī)格型號：96T/48T小鼠磷脂酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠磷脂酶試劑盒、小鼠磷脂酶eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒規(guī)格型號：96T/48T大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒、大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
大鼠免疫球G試劑盒規(guī)格型號：96T/48T大鼠免疫球G試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠免疫球G試劑盒、大鼠免疫球Geisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
大鼠可溶性核κB受體活化配基試劑盒規(guī)格型號：96T/48T大鼠可溶性核κB受體活化配基試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠可溶性核κB受體活化配基試劑盒、大鼠可溶性核κB受體活化配基eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。
大鼠基質(zhì)細胞衍生1β試劑盒規(guī)格型號：96T/48T大鼠基質(zhì)細胞衍生1β試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠基質(zhì)細胞衍生1β試劑盒、大鼠基質(zhì)細胞衍生1βeisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個月。5g    剛果紅    
250 mL    戊二醛磷酸緩沖固定液    
衣    CAS11089-65-9    5mg
F12K 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )    19-0070-500    500mL
磁珠血液 DNAout    130509-50    50 次
100g    瓊脂粉    
250g    D- 無水葡萄糖    
5次    大提柱式植物 RNAout    
50mL    內(nèi)毒素清除親和介質(zhì)    
人類單鏈選擇性單功能尿嘧啶 -DNA 糖基化酶    130649-500    500U
柱式探針純化試劑盒    121122-10    10 次
5mL    TCEP 溶液，0.5M    
50μL    電泳 SYBR Green I    
100g    Tricine 干粉，電泳     
150 次    DNA 修復混合液     
R- 藻紅蛋白標記親和素    131089-1    1mg
即用型高保真 PCR 試劑盒    90708-9    9mL
10g    脫氧膽酸    
100mg    放線酮    
25mL    四甲基乙二胺    
2000U    T4 RNA 連接酶 2( 截短型 K227Q)    
抑肽酶    CAS9087-70-1    2mg
即用型藍白 T 載體 D 型 ( 無啟動子，有 MCS)    120514-20    20 次
250U    苷脫氨酶    
5g    固藍 BB 鹽    
5g    固綠