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詳細(xì)介紹
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系；pDSr a2-mpl-X價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系；pDSr a2-mpl-X價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
菝葜皂苷元 分子式： 416.64 分子量： C27H44O3 英文名稱： Sarsasapogenin CAS號(hào)： 126-19-2
炔諾肟酯 分子式： 369.5 分子量： C23H31NO3 英文名稱： Acetylene and the CAS號(hào)： 35189-28-7
西布 分子式： 473.58 分子量： C28H27NO4S 英文名稱： Sibutramine CAS號(hào)： 106650-56-0
甲基橙皮甙 分子式： 624.59 分子量： C29H36O15 英文名稱： Methylhesperidin CAS號(hào)： 11013-97-1
穗花杉雙黃酮 分子式： 538.46 分子量： C30H18O10 英文名稱： Amentoflavone CAS號(hào)： 1617-53-4
隱丹參酮 分子式： 296.3603 分子量： C19H20O3 英文名稱： Implicit Salvia CAS號(hào)： 35825-57-1
脫水穿心蓮內(nèi)酯 分子式： 332.43392 分子量： C20H28O4 英文名稱： Dehydroandrographolide CAS號(hào)： 134418-28-3
羥基積雪草苷 分子式： 975.12092 分子量： C48H78O20 英文名稱： Hydroxy group CAS號(hào)： 34540-22-2
氯化木蘭花堿 分子式： 377.86186 分子量： C20H24ClNO4 英文名稱： Chlorinated Magnolia CAS號(hào)： 100mg 細(xì)胞色素 C
5mL 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 不含動(dòng)物成分
100g DNA GuSCN( 異硫氰酸胍 )
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 555·7-AAD） 140629-20 20 次
Southern Marker DL2000( 生物素 ) 120654C-20 20 次
50 次 石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒
5mL 動(dòng)物上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子
25g DEAE 葡聚糖凝膠 A-25
5mg 彈性蛋白酶
離析酶 R-10 CAS9032-75-1 1g
亮抑蛋白酶肽溶液，10 mg/mL 100836-1 1mL
1.5mL 柱式內(nèi)毒素清除劑
500 次 MTS 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒
50 T ATP 酶測(cè)試盒 ( 組織及細(xì)胞膜需高速離心 )
200 次 一管式病毒 DNAout
1mL Rosetta(DE3) 種
ATP 硫酸化酶 130660-10 10U
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (AMV-Taq) 130921-50 50 次
250mL Western 印跡膜洗膜液
100 T 過氧化氫酶測(cè)試盒 ( 可見光比色法 )
250g 蔗糖
250 mL 乙醇 - 甲醛固定液
吐溫 -80 CAS9005-65-6 100mL
HAT 篩選培養(yǎng)基 19-0090-500 500mL
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