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詳細(xì)介紹
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞；CHL價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞；CHL價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雌性中國(guó)倉(cāng)鼠的肺組織。1970年由Koyama 等建立。廣泛應(yīng)用于化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)的染色體畸變檢測(cè)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1：3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體 25-29;27
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
考馬斯亮藍(lán)G250 分子式： 854.02 分子量： C47H48N3NaO7S2 英文名稱： Kaumas blue G250 CAS號(hào)： 6104-58-1
1,2,3,5-四氯苯 分子式： 215.89 分子量： C6H2Cl4 英文名稱： 1,2,3,5- four CAS號(hào)： 634-90-2
氨芐青霉素 分子式： 403.45 分子量： C16H25N3O7S 英文名稱： Ampicillin CAS號(hào)： 7177-48-2
OP乳化劑 分子式： 324.41192 分子量： C18H28O5 英文名稱： OP emulsifier CAS號(hào)： 9002-93-1
硫代米氏酮 分子式： 284.42 分子量： C17H20N2S 英文名稱： TMK CAS號(hào)： 1226-46-6
亮綠 分子式： 792.84 分子量： C37H34N2Na2O9S3 英文名稱： Bright green CAS號(hào)： 633-03-4
8-氨基萘-1,6-二磺酸 分子式： 303.31 分子量： C10H9NO6S2 英文名稱： 8- two sulfonic acid CAS號(hào)： 129-91-9
鉛試劑 分子式： 256.33 分子量： C13H12N4S； C6H5NHNHCSN= 英文名稱： Lead reagent CAS號(hào)： 1960/10/6
鄰苯二甲酸 分子式： 166.13 分子量： C8H6O4 英文名稱： Two formic acid CAS號(hào)： 88-99-3
1,2-二氯丙烯 分子式： 110.97 分子量： C3H4Cl2 英文名稱： 1,2- two chloride CAS號(hào)： 563-54-21mL XL1-Blue 種
1g 肝素
5g 氯化銨 T
10 次 柱式植物 mtDNAout，測(cè)序
磷酸肌酸二鹽 CAS19333-65-4 10mg
C41(DE3) 種 12-227 1mL
50 次 血液 RNAout
10mL 紅溶液 ,100mg/mL
1g 5- 磷酸吡哆醛，一水
50 次 SDS-PAGE 樣品制備試劑盒
L- 谷氨酸 CAS6106-04-3 25g
YPDG 液體培養(yǎng)基 130897-100 100mL
500g 胰蛋白胨
1g 膠原蛋白Ⅰ型
100mL 交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B
0.1mg 山羊抗兔 IgG，熒光素 488 標(biāo)記
1- 萘胺 CAS134-32-7 5g
小鼠抗 GFP 標(biāo)簽單抗 130580-100 100μL
100g 植物凝膠
25g L- 精氨酸
5g #NAME?
500g 腦心浸液
葡聚糖凝膠 LH-20 CAS9041-37-6 25g
SDS-PAGE 濃縮膠配膠液 100867-500 500mL
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