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詳細(xì)介紹
倉鼠腎細(xì)胞；HL-1說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 倉鼠腎細(xì)胞；HL-1說明書
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
龍血素B 分子式： 316.35 分子量： C18H20O5 英文名稱： Loureirin B CAS號： 119425-90-0
高烏甲素 分子式： 584.71 分子量： C32H44N2O8 英文名稱： Gao Wu CAS號： 32854-75-4
二氫石蒜堿 分子式： 289.32636 分子量： C16H19NO4 英文名稱： Two Shi Suanjian CAS號： 6271-21-2
扁蓄苷 分子式： 434.35032 分子量： C20H18O11 英文名稱： Avicularin CAS號： 22255-13-6
活性艷藍(lán)KN-R 分子式： 626.54 分子量： C22H16N2Na2O11S3 英文名稱： Reactive brilliant blue KN-R CAS號： 2580-78-1
吖啶紅 分子式： 274.75 分子量： C15H15ClN2O 英文名稱： Ya Dinghong CAS號： 2465-29-4
酸性ATT 分子式： 分子量： 英文名稱： Acid black ATT CAS號：
Dichloro[8-(di-tert-butylphosphinooxy)quinoline]palladium(II) 分子式： 分子量： 英文名稱： Dichloro[8- (di-tert-butylphosphinooxy) quinoline]palladium (II) CAS號： 1100332-45-3
鹽酸溴己新 分子式： 412.59 分子量： C14H21Br2ClN2 英文名稱： Hydrochloric acid bromide CAS號： 611-75-6
鈀碳觸媒 分子式： 分子量： 英文名稱： Palladium carbon catalyst CAS號：
二苯胺磺酸鈉 分子式： 271.27 分子量： C12H10NNaO3S 英文名稱： Two aniline sulfonic acid sodium CAS號： 6152-67-6
天青I 分子式： 305.83 分子量： C15H16ClN3S 英文名稱： Azure I CAS號： 531-55-5
1000U Mlu
200U AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶
2500U RNase 抑制劑 ( 人源 )
5次 天凈沙非同位素探針雜交試劑盒
GpC 甲基轉(zhuǎn)移酶 (M.CviPI) 130653-200 200U
cDNA *鏈合成試劑盒 60906-50 50 次
1000 μL VDAC1 小鼠單抗
100mL 非凍型拭子 DNA 保存液 B( 有拭子 )
25g 葡聚糖凝膠 G-15
10mg Hoechst33342 干粉
L- 天門冬氨酸 CAS56-84-8 25g
lambda(λ)DNA 90407A-5 5μg
10 次 小 RNA 克隆試劑盒
1套 硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 )
250g 聚乙二醇 6000
25μL Cy3-dCTP 溶液，10mM
3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸 CAS59-92-7 5g
SURE 種 12-255 1mL
50 次 一步法無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout
1g 姬姆色素染料
5g 固藍(lán) BB 鹽
100mg 辣根過氧化物酶，偶聯(lián)
吲哚 -3- 丁酸 CAS133-32-4 1g
RIPA 裂解液 ( 強(qiáng) ) 131006-100 100mL
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