詳細(xì)介紹
敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系是于1961年由Macpherson IA、Stoker MGP建系,源自5只未辨性別的1天齡倉(cāng)鼠腎;可作為轉(zhuǎn)化宿主;OIE組織將該細(xì)胞用于狂犬病的診斷。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體 42-44
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
高車前素 分子式: 300.26288 分子量: C16H12O6 英文名稱: High car CAS號(hào): 1447-88-7
二氫辣椒素 分子式: 307.43 分子量: C18H29NO3 英文名稱: Two hydrogen capsaicin CAS號(hào): 19408-84-5
貝萼皂苷元 分子式: 488.7 分子量: C30H48O5 英文名稱: Shell sepal saponin CAS號(hào): 6989-24-8
溶劑橙2 分子式: 262.31 分子量: C17H14N2O 英文名稱: Solvent Orange 2 CAS號(hào): 2646-17-5
間甲基紅 分子式: 269.3 分子量: C15H15N3O2 英文名稱: Methyl red CAS號(hào): 20691-84-3
酸性黃17 分子式: 551.29 分子量: C16H10Cl2N4Na2O7 英文名稱: Acid yellow 17 CAS號(hào): 6359-98-4
BOC-3,5-DIIODO-TYR-OSU 分子式: 630.17 分子量: C18H20I2N2O7 英文名稱: BOC-3,5-DIIODO-TYR-OSU CAS號(hào): 163679-35-4
2,3,5,6-四氟苯酚鉀鹽 分子式: 204.16 分子量: C6HF4KO 英文名稱: 2,3,5,6- PTFE phenol potassium salt CAS號(hào): 42289-34-9
101白色擔(dān)體 分子式: 分子量: 英文名稱: 101 white bear CAS號(hào):
考馬斯亮藍(lán)R250 分子式: 825.97 分子量: C45H44N3NaO7S2 英文名稱: Kaumas blue R250 CAS號(hào): 6104-59-2
曙紅Y(水溶) 分子式: 691.85 分子量: C20H6Br4Na2O5 英文名稱: Eosin Y (Shui Rong) CAS號(hào): 17372-87-1 5μg lambda(λ)DNA
100U PreScissiom 蛋白酶
二硫赤蘚醇 CAS6892-68-8 1g
細(xì)總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒 90902-30 30 次
250 mL Zenker 固定液
100μg 鏈激酶
96 支 10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅長(zhǎng)尖 )
25mg TSQ(6- 甲氧基 -(8-p- 甲苯磺酰胺 ) 喹啉
0.5mL dGTP 溶液,100mM
乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶測(cè)試盒 18-0650-20 20 T
核酸印跡膜染液 70104-100 100mL
5次 TdT 加尾法 DNA 地高標(biāo)記試劑盒
10mL 電泳橙黃 G 溶液
50 次 柱式尿液 DNAout
50 次 即用型多重 PCR 試劑盒
熒光素標(biāo)記的生物素 131093-5 5mg
即用型熒光定量 PCR 試劑盒 90408-600 600 次
10 次 非變性法蛋白沉淀試劑盒
25mg 刀豆蛋白 A IV
30μg φX174RF Ⅰ DNA
L- 阿拉伯糖 CAS5328-37-0 10g
克必隆零背景 T 載體 131233-20 20 次