詳細(xì)介紹
dGTP 溶液,2.5mM2mL*使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
3. 電泳檢測(cè)是否得到預(yù)計(jì)長(zhǎng)度的 PCR 產(chǎn)物。
dGTP 溶液,2.5mM2mL*產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
產(chǎn)品介紹:
規(guī)格及成分:
F'lacZ+cI857
kanMX
L3799
lambda gt101(lambdagt101)
mCerulean
p3xFLAG-CMV-14(p3xFLAGCMV14)
pAcGP67-C(pAcGP67C)
pAG424GAL-EGFP-ccdB(pAG424GALEGFPccdB)
pARO181
pBAD33(60908-629)
pBiFC-bJunVN173(pBiFCbJunVN173)
pBPV-beta1(pBPVbeta1)
pCAMBIA1301(60908-1230)y
pcDNA3.1(+)/myc-His C(pcDNA3.1mycHisC)(60908-1540)
pcDNA6/V5-His B(pcDNA6V5HisB)
pCMV-C-flag釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
湯卜遜沙門氏菌 Salmonella thompson
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
J82(人膀胱細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
尖孢鐮刀菌棉花?;?Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum
蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液-BSA5x1ml國(guó)產(chǎn)
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
灰褐牛肝菌 Boletus griseus
小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞英文名稱:DCS
人膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
解烴棒桿菌 Corynebacterium nydrocarboclastus
VE(人血管內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
串珠菌 Leuconostoc lactis
暫無(wú) Pseudomonas dacunhae
黑木耳 Auricularia auricula