詳細(xì)介紹
Deaza dGTP0.4mL*使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
3. 電泳檢測(cè)是否得到預(yù)計(jì)長(zhǎng)度的 PCR 產(chǎn)物。
Deaza dGTP0.4mL*產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專(zhuān)門(mén)為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
產(chǎn)品介紹:
規(guī)格及成分:
Freshwater hd medium
Halobacteroides acetoethylicus medium
Hyphomicrobium methylovorum medium
Marine broth (anaerob)
Methanocalculus mb medium
Methylotrophic arthrobacter and hyphomicrobium medium
Modified yma medium
OS medium
PY+X medium (n2/co2)
Rouf's medium
Sporobacter medium
T medium
Thermotoga subterranea mediumB16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
鴨沙門(mén)氏菌 Salmonella anatum
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
Primary Antibody Diluent/一抗稀釋液(綠色)20ml國(guó)產(chǎn)gersion
窄脊正青霉 Eupenicillium angustiporcatum
黑木耳 Auricularia auricula
中華鱉肺來(lái)源細(xì)胞英文名稱(chēng):CSSTL1
小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
平菇 Pleurotus ostreatus
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
NCI-H1650(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
傘枝犁霉 Absidia corymbifera
棉阿舒囊霉 Ashbya gossypii
小鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞英文名稱(chēng):MouseS
大鼠心肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
狀絲孢酵母 Trichosporon capitatum
Tryptone soya broth (tsb)
GAL指示劑培養(yǎng)基
大腸桿菌JM83菌種
293E細(xì)胞株