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          cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次成分

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-02-09 20:42:48瀏覽次數(shù):544

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次成分運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 有效期為一年。

          詳細(xì)介紹

          cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次成分產(chǎn)品及特點(diǎn):

          易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專(zhuān)門(mén)為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
          1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
          2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
          3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
          4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
          5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。 
          cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次成分產(chǎn)品介紹:

          規(guī)格及成分:

          使用方法:
          1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
          2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
          3. 電泳檢測(cè)是否得到預(yù)計(jì)長(zhǎng)度的 PCR 產(chǎn)物。

          pBP97
          pCAMBIA1281Z
          pcDNA3.1(+)/GFP(此質(zhì)粒已經(jīng)由升版pcDNA3.1-EGFP替代)
          pcDNA6/myc-His C(pcDNA6mycHisC)
          pCMV-AD (pCMVAD )(60908-1960)
          pCMV6-AC-His(pCMV6ACHis)
          pcos1EMBL
          pDB.His.MBP
          pDRAV-4(pDRAV4)
          pECFP-Mito(pECFPMito)(60908-2552)
          pENTR4-FLAG(pENTR4FLAG)(60908-2742)
          pET-3xa(pET3xa)
          pET22b-CPDSalI(pET22bCPDSalI)嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
          豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
          SW626(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
          需鈉弧菌 Vibrio natriegens
          中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
          Improved-Hematoxylin/改良型蘇木素(IHC常用復(fù)染試劑)10ml國(guó)產(chǎn)
          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
          尖孢鐮刀菌豌豆專(zhuān)化型 Fusarium oxysporum f. sp. pisi
          大鼠支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
          熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
          BHK-21(倉(cāng)鼠腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
          薛瓦酵母 Saccharomyces chevalieri
          苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
          ProteinFree Blocking Buffer100ml100mlgersion
          暫無(wú) Achromobacter xerosis
          黑木耳 Auricularia auricula
          中性紅染色液規(guī)格:100ml
          小鼠子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
          皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum
          費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
          NCI-H2087(人非小細(xì)胞肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
          pFA6a-13Myc-kanMX6(pFA6a13MyckanMX6)
          pfdA2
          pGADCg
          pGEX-5X-3(pGEX5X3)
          pGL4.38[luc2P p53 RE Hygro]
          pGZ(60908-4065y)

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