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          Ⅱ型肺泡上皮細胞

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          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 型號
          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-13 13:25:49瀏覽次數(shù):291

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X1302 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          Ⅱ型肺泡上皮細胞公司其它各種產(chǎn)品大鼠肌紅蛋白(MB)elisa檢測試劑盒
          大鼠肌生成抑制素(MSTN)elisa檢測試劑盒
          大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)elisa檢測試劑盒
          大鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)elisa檢測試劑盒
          大鼠基質(zhì)金屬-1(MMP-1)elisa檢測試劑盒

          詳細介紹

          培養(yǎng)操作:
          1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
          2
          )細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
          1.
          棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
          2.
          1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
          3.
          6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
          4.
          將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3
          )細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
          1.
          細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
          2. 4 min 1000rpm
          離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
          3.
          將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          Ⅱ型肺泡上皮細胞

          規(guī)格

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號

          GOY-01X1302

          名稱    Ⅱ型肺泡上皮細胞
          2.組織來源:肺組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          4.細胞簡介:

          Ⅱ型肺泡上皮細胞分離自肺組織;肺泡由單層上皮細胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。小肺泡細胞,又稱I型肺泡細胞,厚約0.1微米,基底部是基底膜,無增殖能力。大肺泡細胞,又稱Ⅱ型肺泡細胞,分泌表面活性物質(zhì)(二棕櫚酰),以降低肺泡表面張力。Ⅱ型肺泡細胞位于Ⅰ型肺泡細胞之間,數(shù)量較Ⅰ型肺泡細胞多,但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細胞小。細胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。細胞核圓形,胞質(zhì)著色淺、呈泡沫狀。電鏡下,細胞游離而有少量微絨毛,胞質(zhì)內(nèi)富含線粒體和溶酶體,有較發(fā)達的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體。核上方有較多的分泌顆粒,電子密度高、大小不等,直徑約0.1-1.0μm顆粒內(nèi)含有平行排列的板層狀結(jié)構(gòu),稱為嗜餓性板層小體。小體內(nèi)的主要成分為磷脂,以二棕櫚酰為主,此外還有糖胺多糖及蛋白質(zhì)等。顆粒內(nèi)物質(zhì)釋放出來后,在肺泡表面形成一層粘液層,稱為表面活性物質(zhì)(surfactant)。表面活性物質(zhì)有降低肺泡表面張力、穩(wěn)定肺泡大小的作用。呼氣時肺泡縮小,表面活性物質(zhì)密度增加,表面張力降低,防止肺泡過度塌陷;吸氣時肺泡擴張,表面活性物質(zhì)密度減小,肺泡回縮力加大,可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質(zhì)的缺乏或變性均可引起肺不張,過度通氣可造成表面活性物質(zhì)缺乏;吸入毒氣可直接破壞表面活性物質(zhì)。Ⅱ型肺泡細胞有分裂、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細胞的潛能,故具有修復(fù)受損傷上皮的作用。

          5.方法簡介:

          公司實驗室分離的人Ⅱ型肺泡上皮細胞采用彈性消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測:

          公司實驗室分離的人Ⅱ型肺泡上皮細胞經(jīng)SP-C免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

          培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

          換液頻率 2-3天換液一次

          生長特性 貼壁

          細胞形態(tài) 上皮細胞樣

          傳代特性 可傳1-2代左右

          消化液 0.25%

          培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

          實驗報告:
          產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
          1
          、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大??;
          2
          、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
          3
          、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
          4
          、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
          5
          、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
          二、免疫熒光鑒定:
          1
          、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
          2
          PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
          3
          、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
          4
          、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
          5
          、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
          6
          、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
          斯氏李斯特氏菌   Georgeniamuralis

          比基尼鏈霉菌   華美鏈霉菌

          鳳尾菇、漏斗狀側(cè)耳   謝氏桿菌

          棉鈴蟲擬青霉   副氏志賀氏菌ATCC 12022

          蘇云金芽胞桿菌庫爾斯塔克亞種Bacillusthuringiensissubsp.kurstaki   奇異變形桿菌ATCC 12453
          葡萄糖脫氫酶(GCDH)試劑盒

          葡萄糖脫氫酶(GCDH)試劑盒

          總糖含量測定試劑盒

          總糖含量測定試劑盒

          纖維素含量(CLL)測試盒
          Ⅱ型肺泡上皮細胞小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)elisa檢測試劑盒

          小鼠E1A激活基因阻遏子1(CREG1)elisa檢測試劑盒

          小鼠E1A結(jié)合蛋白P300(EP300)elisa檢測試劑盒

          小鼠E3泛素蛋白連接酶TRIM68(TRIM68)elisa分析檢測試劑盒

          小鼠E3泛素蛋白連接酶TRIM68(TRIM68)elisa檢測試劑盒

          冷凍保存細胞之方法?
          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。


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