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          大鼠外周血中性粒細胞

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          • 型號
          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-13 11:22:46瀏覽次數(shù):209

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X1244 應用領域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          大鼠外周血中性粒細胞公司其它各種產(chǎn)品G21蛋白質(zhì)抗體 艾滋病病毒制約錨定蛋白抗體
          腈水解酶1抗體 艾滋病病毒抗體
          神經(jīng)腫瘤Nova2抗原抗體 艾滋病病毒復制結合蛋白抗體
          受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體 艾滋病病毒p55抗體
          富含重復結構域蛋白2抗體 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體

          詳細介紹

          冷凍保存細胞之方法?
          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

          圖片13.jpg

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          大鼠外周血中性粒細胞

          規(guī)格

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號

          GOY-01X1244

          名稱    大鼠外周血中性粒細胞
          2.組織來源:外周血

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          4.細胞簡介:

          大鼠外周血中性粒細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞是一類無色、球形、有核的血細胞。白細胞不是一個均一的細胞群,根據(jù)其形態(tài)、功能和來源部位可以分為三大類:粒細胞、單核細胞和淋巴細胞,其中粒細胞又可根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的染色性質(zhì)不同,分為中性粒細胞、嗜酸粒細胞和嗜堿粒細胞三種。中性粒細胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中,胞質(zhì)呈無色或極淺的淡紅色,有許多彌散分布的細小的(0.20.4微米)淺紅或淺紫色的*顆粒。細胞核呈桿狀或25分葉狀,葉與葉間有細絲相連。中性粒細胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細胞來源于骨髓,具有分葉形或桿狀的核,胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細顆粒。這些顆粒多是溶酶體,內(nèi)含髓過氧化酶、、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類,與細胞的吞噬和消化功能有關。中性粒細胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用,它處于機體抵御微生物病原體,特別是在化膿性細菌入侵的線,具有很強的吞噬活性,可吞噬細菌、衰老的紅細胞、抗原一抗體復合物和壞死的細胞等。中性粒細胞內(nèi)含有大量溶酶體酶,因此能將吞噬入細胞內(nèi)的細菌和組織碎片*分解。當中性粒細胞吞噬數(shù)十個細菌后,自身發(fā)生解體,所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液。中性粒細胞是人體內(nèi)壽命短的細胞,一般體外培養(yǎng)12-24h內(nèi)活性穩(wěn)定,48h活性下降,96h基本死亡。

          5.方法簡介:

          公司實驗室分離的大鼠外周血中性粒細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測:

          公司實驗室分離的大鼠外周血中性粒細胞經(jīng)瑞氏染色法,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

          換液頻率 2-3天換液一次

          生長特性 懸浮

          細胞形態(tài) 圓形

          傳代特性 不增殖;不傳代

          消化液 0.25%

          培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

          培養(yǎng)操作:
          1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
          2
          )細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
          1.
          棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
          2.
          1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
          3.
          6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
          4.
          將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3
          )細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
          1.
          細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
          2. 4 min 1000rpm
          離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
          3.
          將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
          沙保羅瓊脂平板90mm   玫瑰產(chǎn)色鏈霉菌

          新鞘氨醇單胞菌   園弧青霉=桔灰青霉

          蘑菇假單胞菌   盤長孢菌(魯保一號)

          糙孢曲霉  

          桔青霉   無花果曲霉
          雞α1酸性糖蛋白(OGCHI)elisa分析檢測試劑盒

          雞α/β水解酶域包含蛋白5(ABHD5)elisa分析檢測試劑盒

          Toll樣受體4(TLR4)elisa分析檢測試劑盒

          N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa分析檢測試劑盒

          L苯丙解氨酶(PAL)elisa分析檢測試劑盒
          大鼠外周血中性粒細胞兔白介素12(IL-12/P70)elisa檢測試劑盒

          兔白介素17(IL-17)elisa分析檢測試劑盒

          兔白介素17(IL-17)elisa檢測試劑盒

          兔白介素18IL18elisa檢測試劑盒

          兔白介素1βelisa檢測試劑盒
          實驗報告:
          產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
          1
          、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大??;
          2
          、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
          3
          、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
          4
          、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
          5
          、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
          二、免疫熒光鑒定:
          1
          、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
          2
          PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
          3
          PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
          4
          、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
          5
          、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
          6
          、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


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