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          小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

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          • 品牌 R&D/美國(guó)
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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-13 10:30:12瀏覽次數(shù):169

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號(hào) GOY-01X1196 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司其它各種產(chǎn)品黑色素瘤相關(guān)抗原B6抗體 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23抗體
          黑色素瘤相關(guān)抗原B2抗體 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子22抗體
          黑色素瘤相關(guān)抗原B4抗體 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21抗體
          黑色素瘤相關(guān)抗原C1抗體 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子20抗體
          組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體(腦膜瘤表達(dá)抗原5) 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子19抗體

          詳細(xì)介紹

          培養(yǎng)操作:
          1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
          2
          )細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          1.
          棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
          2.
          1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
          3.
          6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
          4.
          將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3
          )細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
          1.
          細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
          2. 4 min 1000rpm
          離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
          3.
          將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          圖片13.jpg

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

          規(guī)格

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號(hào)

          GOY-01X1196

          名稱    小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
          2.組織來(lái)源:腸組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長(zhǎng)的一段,也是功能重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘?jiān)?,形成糞便,再通過(guò)直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。微血管是極細(xì)微的血管,管徑平均為6-9μm,連于動(dòng)、靜脈之間,互相連接成網(wǎng)狀。微血管壁薄,管徑較小,血流很慢,通透性大。其功能是利于血液與組織之間進(jìn)行物質(zhì)交換。其管壁主要由一層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成,在內(nèi)皮外面有一薄層結(jié)締組織。另外還??梢?jiàn)到一種扁而有突起的細(xì)胞貼在微血管的管壁外面,稱為周細(xì)胞。

          5.方法簡(jiǎn)介:

          公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測(cè):

          公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

          培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

          換液頻率 2-3天換液一次

          生長(zhǎng)特性 貼壁

          細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

          傳代特性 可傳2-3

          消化液 0.25%

          培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
          產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
          1
          、無(wú)菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大小;
          2
          、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
          3
          、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
          4
          、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
          5
          、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
          二、免疫熒光鑒定:
          1
          、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
          2
          、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
          3
          、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
          4
          、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
          5
          PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
          6
          、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
          人蒼白桿菌   伊氏李斯特氏菌

          白色念珠菌AS2.2086凍干粉   蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

          熒光威克酵母   淡紫青霉

          登佐鏈霉菌   假芝

          嗜熱脂肪芽孢桿菌凍干粉   呂宋馬杜拉 Actinomadura luzonensis
          甘油三酯(TG)含量測(cè)試盒

          羥(HYP)測(cè)試盒

          羥(HYP)測(cè)試盒

          丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒

          丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒
          小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞人血栓素B2TXB2elisa檢測(cè)試劑盒

          人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TMelisa檢測(cè)試劑盒

          人血小板生成素(TPOelisa檢測(cè)試劑盒

          人血小板衍化生長(zhǎng)因子(PDGF-BBelisa檢測(cè)試劑盒

          人血小板衍化生長(zhǎng)因子-BBPDGF-BBelisa檢測(cè)試劑盒

          冷凍保存細(xì)胞之方法?
          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。


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