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          大鼠呼吸道上皮細胞

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          • 型號
          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-13 10:08:59瀏覽次數(shù):149

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X1182 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          大鼠呼吸道上皮細胞公司其它各種產(chǎn)品肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體 蛋白質(zhì)0酸酶-2A抗體
          黑素皮質(zhì)素受體4抗體 蛋白質(zhì)0酸酶2A-B55抗體
          黑素皮質(zhì)素受體5抗體 蛋白質(zhì)0酸酶1G抗體(PP2Cγ)
          甲狀腺激素轉(zhuǎn)運蛋白/單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白7/8抗體 蛋白質(zhì)0酸酶1B抗體(PP2Cβ)
          自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈β3抗體 蛋白質(zhì)JAK2抗體

          詳細介紹

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          大鼠呼吸道上皮細胞

          規(guī)格

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號

          GOY-01X1182

          名稱    大鼠呼吸道上皮細胞
          2.組織來源:呼吸道

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          4.細胞簡介:

          大鼠呼吸道上皮細胞分離自呼吸道;呼吸道是肺呼吸時氣流所經(jīng)過的通道,有肺脊椎動物的呼吸道分上、下兩部:鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道,合稱為下呼吸道,或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動物的進化逐漸復雜化的。整個呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛(鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外),它能溫暖(或冷卻)、濕潤和凈化吸入的空氣,對于呼吸器官和機體有著保護作用。呼吸道以骨或軟骨做支架,其內(nèi)表面覆蓋著黏膜,黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細血管。呼吸道上皮細胞屬于假復層纖毛柱狀上皮,分布于呼吸道的內(nèi)表面,主要由柱狀,杯形,梭形和錐形等不同形狀細胞組成??瓷先ハ駨蛯由掀?,但實際上所有細胞底部均附于基膜上,屬單層上皮,故稱假復層柱狀上皮,上皮表面有纖毛,杯狀細胞可分泌粘液,包裹著大量細菌,借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。

          5.方法簡介:

          公司實驗室分離的大鼠呼吸道上皮細胞采用鏈霉-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測:

          公司實驗室分離的大鼠呼吸道上皮細胞經(jīng)pan-cytokeratin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

          培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

          換液頻率 2-3天換液一次

          生長特性 貼壁

          細胞形態(tài) 上皮細胞樣

          傳代特性 可傳1-2

          消化液 0.25%

          培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

          圖片13.jpg

          冷凍保存細胞之方法?
          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
          培養(yǎng)操作:
          1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
          2
          )細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
          1.
          棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
          2.
          1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
          3.
          6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
          4.
          將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3
          )細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
          1.
          細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
          2. 4 min 1000rpm
          離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
          3.
          將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
          實驗報告:
          產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
          1
          、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大?。?/span>
          2
          、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
          3
          、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
          4
          、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
          5
          、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
          二、免疫熒光鑒定:
          1
          、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
          2
          、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
          3
          、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
          4
          、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
          5
          、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
          6
          、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
          去整合素樣金屬2抗體

          腺苷脫氨酶抗體

          含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體

          腺苷A1受體抗體

          載脂蛋白E2受體抗體
          大鼠總(TC)elisa檢測試劑盒

          大鼠自然抗性相關(guān)巨噬細胞蛋白1(NRAMP-1)elisa檢測試劑盒

          大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)elisa檢測試劑盒

          大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)elisa檢測試劑盒

          大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)elisa檢測試劑盒
          大鼠呼吸道上皮細胞人基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/SDF1B)elisa分析檢測試劑盒

          人激動異構(gòu)酶/細胞分裂素MB(CKMB)elisa分析檢測試劑盒

          人激素敏感性脂肪酶(HSL)elisa分析檢測試劑盒

          人激素敏感脂肪酶(HSLelisa檢測試劑盒

          1(KLK 1)elisa分析檢測試劑盒


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