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          CHL (倉鼠肺細胞)

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          • 型號
          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質 經銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-06 13:37:08瀏覽次數:317

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

          產品簡介

          供貨周期 現貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0060 應用領域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          CHL (倉鼠肺細胞)公司其它各種產品細胞維甲酸結合蛋白2抗體 神經肽Y受體5抗體
          2號染色體開放閱讀框80抗體 神經肽Y受體4抗體
          0酸化CD32B抗體 神經肽Y受體2抗體
          過敏毒素C3(補體C3)抗體 神經肽Y抗體
          癌胚抗原相關細胞粘附分子抗體 神經肽Y1受體抗體

          詳細介紹

          產品屬性:

          產品名稱

          CHL (倉鼠肺細胞)

          規(guī)格

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號

          GOY-01X0060

          名稱    CHL (倉鼠肺細胞)
          別稱 Chinese Hamster Lung

          種屬 中國倉鼠

          年齡(性別) 1日齡

          組織來源 皮膚

          生長特性 貼壁細胞

          細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

          背景描述 CHL細胞廣泛應用于染色體異常測試。

          生物安全等級 1

          生長培養(yǎng)基 DMEM10% FBS1% P/S

          推薦傳代比例 1:3-1:4

          推薦換液頻率 2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%CO2,5%

          溫度:37

          基因表達情況 human tissue plasminogen activator(t-PA)

          保藏機構 ECACC; 87111906

          圖片13.jpg

          冷凍保存細胞之方法?
          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
          培養(yǎng)操作:
          1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
          2
          )細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
          1.
          棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
          2.
          1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
          3.
          6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
          4.
          將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3
          )細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
          1.
          細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。
          2. 4 min 1000rpm
          離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
          3.
          將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
          實驗報告:
          產品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
          1
          、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
          2
          、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
          3
          、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
          4
          、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
          5
          、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
          二、免疫熒光鑒定:
          1
          、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
          2
          PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
          3
          PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
          4
          、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
          5
          、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
          6
          、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
          頂青霉   肺形側耳、柳樹菌、樹窩

          大腸桿菌Escherichiacoli   彎曲芽孢桿菌

          改良月桂基鹽胰蛋白胨肉湯-萬古酶素10ml 30 /   總狀毛霉

          平蓋靈芝(樹舌)   0.1%蛋白胨水溶液100ml

          食酸菌   水螺菌
          大鼠β內啡肽受體(β-EPR)elisa分析檢測試劑盒

          大鼠β內啡肽(β-EP)elisa分析檢測試劑盒

          大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)elisa分析檢測試劑盒

          大鼠β防御素2(DEFB2)elisa分析檢測試劑盒

          大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa分析檢測試劑盒
          CHL (
          倉鼠肺細胞)大鼠載脂蛋白B48(Apo B48)elisa檢測試劑盒

          大鼠載脂蛋白B-48(ApoB48)elisa檢測試劑盒

          大鼠載脂蛋白C1(APOC1)elisa檢測試劑盒

          大鼠載脂蛋白C2(APOC2)elisa檢測試劑盒

          大鼠載脂蛋白C3Apo C3elisa檢測試劑盒


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