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          UM-UC-3 (膀胱移行細胞癌)

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          • 型號
          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-02 16:03:40瀏覽次數(shù):142

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0459 應用領域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          UM-UC-3 (膀胱移行細胞癌)公司其它各種產(chǎn)品血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體 真核翻譯延長因子2抗體
          ABI1/SSH3BP1蛋白抗體 真核翻譯起始因子5抗體
          乙?;M蛋白H1b抗體 真核翻譯起始因子4G抗體
          丙氨酰tRNA合成酶2抗體 真核翻譯起始因子4E抗體
          絲氨酸抑制蛋白激酶C底物抗體 真核翻譯起始因子4B抗體

          詳細介紹

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          UM-UC-3 (膀胱移行細胞癌)

          規(guī)格

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號

          GOY-01X0459

          名稱    UM-UC-3 (膀胱移行細胞癌) (STR鑒定正確)
          別稱 UMUC-3; UM-UC3; UMUC3; UC-3; University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

          種屬 人類

          年齡(性別) 男性

          組織來源 器官:膀胱; 疾?。阂菩屑毎?/span>

          生長特性 貼壁細胞

          細胞形態(tài) 上皮細胞樣

          生物安全等級 1

          生長培養(yǎng)基 MEM10% FBS1% P/S

          推薦傳代比例 1:3-1:4

          推薦換液頻率 2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%;CO2,5%

          溫度:37

          保藏機構 ATCC; CRL-1749 ECACC; 96020936

          冷凍保存細胞之方法?
          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
          培養(yǎng)操作:
          1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
          2
          )細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
          1.
          棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
          2.
          1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
          3.
          6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
          4.
          將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3
          )細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
          1.
          細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
          2. 4 min 1000rpm
          離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
          3.
          將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
          實驗報告:
          產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
          1
          、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
          2
          、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
          3
          、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
          4
          、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
          5
          、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
          二、免疫熒光鑒定:
          1
          、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
          2
          、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
          3
          PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
          4
          、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
          5
          、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
          6
          、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
          Southern 級細菌 (G-)DNAout10   小鼠內(nèi)皮細胞分離液 1.071200mL

          Southern 級細菌 (G+)DNAout10   小鼠抗 His 標簽單抗100μL

          一步式細菌 DNAout50   小鼠抗 His 標簽單抗1000μL

          分枝桿菌 DNAout50   小鼠抗 Flag 標簽單抗100μL

          柱式分枝桿菌 DNAout50   小牛胸腺 DNA 溶液1mL
          辣根過氧化物酶標記的兔抗豚鼠IgG

          辣根過氧化物酶標記的驢抗豚鼠IgG

          辣根過氧化物酶標記的小鼠抗兔IgM

          辣根過氧化物酶標記的兔抗羊IgM

          膠體金標記的兔抗豚鼠IgG
          UM-UC-3 (
          膀胱移行細胞癌)大鼠防御素β1(DEFβ1)elisa檢測試劑盒

          大鼠非前列腺酸性磷酸酶(NPAPelisa檢測試劑盒

          大鼠非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)elisa檢測試劑盒

          大鼠非受體型蛋白磷酸酶11(PTPN11)elisa檢測試劑盒

          大鼠非轉(zhuǎn)移細胞1表達NM23A蛋白(NME1)elisa檢測試劑盒


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