產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | GOY-01X0461 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
ATP結(jié)合蛋白家族5抗體 真核翻譯起始因子2C3抗體
α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體 真核翻譯起始因子2C2抗體
堿性0酸酶抗體 真核翻譯起始因子2C1抗體
AU1 tag標(biāo)簽抗體 真核翻譯起始因子1抗體
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷(xiāo)售熱線(xiàn) ——
15026555973 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2022-04-02 16:15:10瀏覽次數(shù):189
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | GOY-01X0461 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號(hào) | GOY-01X0461 |
名稱(chēng) WERI-Rb-1 (視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱(chēng) WERI-RB-1; WERI-Rb 1; WERI-Rb1; WERI-RB1; WERI Rb-1; WERI; Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1
種屬 人類(lèi)
年齡(性別) 女性,1歲
組織來(lái)源 眼睛,視網(wǎng)膜
生長(zhǎng)特性 懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 圓形(葡萄狀)
背景描述 WERI-Rb-1細(xì)胞是由R·M·McFall和T·W·Sery于1974年建立的兩株人眼癌細(xì)胞系中的一株。WERI-Rb-1細(xì)胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。掃描電鏡顯示,在WERI-Rb-1細(xì)胞表面囊泡、板狀偽足和微絨毛在數(shù)量上和頻率上的改變。細(xì)胞分化研究,的動(dòng)物模型和生化評(píng)價(jià)都涉及WERI-Rb-1細(xì)胞。
生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
注意事項(xiàng) 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液;請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-169 DSMZ; ACC-90 ECACC; 06070602
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi);
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
Southern 級(jí)細(xì)菌 (G-)DNAout10 次 小鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.071200mL
Southern 級(jí)細(xì)菌 (G+)DNAout10 次 小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗100μL
一步式細(xì)菌 DNAout50 次 小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗1000μL
分枝桿菌 DNAout50 次 小鼠抗 Flag 標(biāo)簽單抗100μL
柱式分枝桿菌 DNAout50 次 小牛胸腺 DNA 溶液1mL
標(biāo)記的兔抗狗IgG
標(biāo)記的兔抗馬IgG
標(biāo)記的羊抗雞IgG
標(biāo)記的兔抗雞IgG
標(biāo)記的兔抗抗體IgG
WERI-Rb-1 (視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)大鼠肥大細(xì)胞類(lèi)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
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