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人鳥(niǎo)苷酸解離抑制因子(GDI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱(chēng):Human Guanine nucleotide dissociation Inhibitor,GDI ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
人鳥(niǎo)苷酸解離抑制因子(GDI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
人鳥(niǎo)苷酸解離抑制因子(GDI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
人鳥(niǎo)苷酸解離抑制因子(GDI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
2-乙氧-4,6-二氟嘧啶英文名稱(chēng):2--4,6-twofCAS號(hào):166524-65-8分子式:160.1214464分子量:C6H6F2N2O
4,6-二氯-5-硝嘧啶英文名稱(chēng):4,6-two-5-nitrogroupCAS號(hào):4316-93-2分子式:193.98分子量:C4HCl2N3O2
2-(4-溴)吡啶英文名稱(chēng):2-(4-)pyridineCAS號(hào):分子式:分子量:
5-氟尿嘧啶英文名稱(chēng):5-CAS號(hào):51-21-8分子式:130.08分子量:C4H3FN2O2
8-羥喹哪啶英文名稱(chēng):8-hydroxygroupCAS號(hào):826-81-3分子式:159.18分子量:C10H9NO
2--4-甲吡啶英文名稱(chēng):2-amino-4-methylpyridineCAS號(hào):695-34-1分子式:108.14分子量:C6H8N2
2-氯-3--4-甲吡啶英文名稱(chēng):2--3-amino-4-CAS號(hào):133627-45-9分子式:142.59分子量:C6H7ClN2
9-吖啶鹽酸鹽英文名稱(chēng):9-aminoacridinehydrochlorideCAS號(hào):52417-22-8分子式:248.71分子量:C13H13ClN2O
磷亞砜英文名稱(chēng):TerbufossulfoxideCAS號(hào):10548-10-4分子式:304.43分子量:C9H21O3PS3
甲對(duì)甲亞砜英文名稱(chēng):MethylparatolueneCAS號(hào):934-72-5分子式:154.23分子量:C8H10OS
乙炔對(duì)甲砜英文名稱(chēng):AcetylenebasedontolueneCAS號(hào):13894-21-8分子式:180.22分子量:C9H8O2S
烯丙砜英文名稱(chēng):VinylbenzeneCAS號(hào):16212-05-8分子式:182.24分子量:C9H10O2S
乙砜英文名稱(chēng):EthylphenylketoneCAS號(hào):599-70-2分子式:170.23分子量:C8H10O2S
(S)-3-四氫呋喃英文名稱(chēng):(S)-3-aminotetrahydrofuranCAS號(hào):104530-79-2分子式:87.12分子量:C4H9NO小鼠子宮頸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
NCI-H1703(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.
異酒香酵母 Brettanomyces anomalus
小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞英文名稱(chēng):A9
大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
狀絲孢酵母 Trichosporon capitatum
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
Lncap clone FGC(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus
蓋囊側(cè)耳 Pleurotus cystidiosus
小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
人鳥(niǎo)苷酸解離抑制因子(GDI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
HFL1(人肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國(guó)臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人腺細(xì)胞英文名稱(chēng):MDA-MB-231
293A,人胚腎上皮細(xì)胞系(腺病毒包裝級(jí)別) Human