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          小鼠頜下腺上皮細(xì)胞

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          • 型號
          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-06 16:43:06瀏覽次數(shù):264

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0758 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          小鼠頜下腺上皮細(xì)胞公司其它各種產(chǎn)品0酸化DNA損傷修復(fù)基因XRCC9抗體 0酸化著絲粒蛋白A
          細(xì)絲蛋白A抗體 0酸化粘著斑激酶抗體
          DNA損傷修復(fù)基因XRCC9抗體 0酸化粘附相關(guān)激酶抗體
          0酸化載脂蛋白A1抗體 0酸化增殖細(xì)胞核抗原抗體
          細(xì)胞外基質(zhì)蛋白FRAS1抗體 0酸化造血祖細(xì)胞激酶抗體

          詳細(xì)介紹

          冷凍保存細(xì)胞之方法?
          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          小鼠頜下腺上皮細(xì)胞

          規(guī)格

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號

          GOY-01X0758

          名稱    小鼠頜下腺上皮細(xì)胞
          2.組織來源:頜下腺組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡介:

          小鼠頜下腺上皮細(xì)胞分離自頜下腺組織;頜下腺是下頜部的唾液腺,左右各一個。頜下腺屬于唾液腺的一種,主要的功能就是分泌唾液。機體共有三大唾液腺,包括腮腺、頜下腺及舌下腺。頜下腺位于下頜骨的下方,接近下頜骨彎曲角附近,所以也叫下頜下腺(下頜骨下方的唾液腺),左右各一,由舌下舌系帶兩側(cè)處伸出頜下腺排泄管,主要分泌黏液和漿液狀性質(zhì)的唾液。頜下腺上皮細(xì)胞是一種高度分化的上皮細(xì)胞,在體外難以長期存活和保持分化狀態(tài);頜下腺的主要病理變化有:①頜下腺炎;②頜下腺囊腫;③頜下腺腫;④頜下腺結(jié)石。

          5.方法簡介:

          公司實驗室分離的小鼠頜下腺上皮細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測:

          公司實驗室分離的小鼠頜下腺上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

          培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          換液頻率 2-3天換液一次

          生長特性 貼壁

          細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

          傳代特性 可傳1-2

          消化液 0.25%

          培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

          培養(yǎng)操作:
          1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
          2
          )細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
          1.
          棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
          2.
          1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
          3.
          6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
          4.
          將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3
          )細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
          1.
          細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
          2. 4 min 1000rpm
          離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
          3.
          將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
          黑曲霉菌凍干粉   新月彎孢霉

          類芽孢桿菌   棒狀桿菌(黃色短桿菌)

          陰溝腸桿菌(陰溝腸桿菌陰溝亞種)   硫乙醇酸鹽平板培養(yǎng)基70mm

          大禿馬勃   金黃色葡萄球菌金黃色亞種

          糖化酵母   弗氏檸檬酸桿菌
          大鼠高密度脂蛋白(HDL-C)elisa分析檢測試劑盒

          大鼠高密度脂蛋白3(HDL3)elisa分析檢測試劑盒

          大鼠高密度脂蛋白2(HDL2)elisa分析檢測試劑盒

          大鼠高密度脂蛋白(HDL)elisa分析檢測試劑盒

          大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)elisa分析檢測試劑盒
          小鼠頜下腺上皮細(xì)胞馬過氧化氫酶(CAT)elisa分析檢測試劑盒

          馬過氧化氫酶(CAT)elisa檢測試劑盒

          馬環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa分析檢測試劑盒

          馬環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa檢測試劑盒

          (cAMP)elisa分析檢測試劑盒
          實驗報告:
          產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
          1
          、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
          2
          、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
          3
          、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
          4
          、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
          5
          、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
          二、免疫熒光鑒定:
          1
          、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
          2
          、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
          3
          、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
          4
          、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
          5
          、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
          6
          、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


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