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          大鼠腮腺細(xì)胞

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          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-06 16:43:35瀏覽次數(shù):186

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號(hào) GOY-01X0763 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          大鼠腮腺細(xì)胞公司其它各種產(chǎn)品脂閥結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 0酸化鋅指蛋白598抗體
          腫瘤/抗原112抗體 0酸化心臟0蛋白抗體
          微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A抗體 0酸化心肌肌鈣蛋白抗體
          FAM50B蛋白抗體 0酸化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體
          形成素2抗體(成蛋白) 0酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          大鼠腮腺細(xì)胞

          規(guī)格

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號(hào)

          GOY-01X0763

          名稱    大鼠腮腺細(xì)胞
          2.組織來源:腮腺組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          大鼠腮腺細(xì)胞分離自腮腺組織;腮腺是哺乳類動(dòng)物口腔中位于下頜角處的最大唾液腺,位于外耳道的前下方,下頜后窩內(nèi)及下頜支的深面。腮腺也是某些無尾目動(dòng)物頸部有毒皮膚腺的聚集體;唾液腺有3對(duì),腮腺、舌下腺和頜下腺,其中最大的一對(duì)是腮腺。腮腺細(xì)胞是高度分化的上皮源性細(xì)胞,是一種營(yíng)養(yǎng)需要復(fù)雜、在一般合成培養(yǎng)基中不易生長(zhǎng),體外培養(yǎng)比較困難。目前,DMEM培養(yǎng)液被認(rèn)為較適于腺細(xì)胞的培養(yǎng)。加入一定量的血清更有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖與分化。另外,接種的細(xì)胞密度也是培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素之一,尤其是在腺細(xì)胞這種單層細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),接種的細(xì)胞總數(shù)量和生長(zhǎng)基質(zhì)表面的細(xì)胞密度對(duì)整個(gè)細(xì)胞的生長(zhǎng)均有影響。

          5.方法簡(jiǎn)介:

          公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腮腺細(xì)胞采用膠原酶-聯(lián)合消化后差速貼壁,結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測(cè):

          公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腮腺細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

          換液頻率 2-3天換液一次

          生長(zhǎng)特性 貼壁

          細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

          傳代特性 可傳1-2

          消化液 0.25%

          培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

          圖片2.jpg

          冷凍保存細(xì)胞之方法?
          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
          培養(yǎng)操作:
          1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
          2
          )細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          1.
          棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
          2.
          1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
          3.
          6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
          4.
          將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3
          )細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
          1.
          細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
          2. 4 min 1000rpm
          離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
          3.
          將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
          產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
          1
          、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
          2
          、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
          3
          、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
          4
          、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
          5
          、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
          二、免疫熒光鑒定:
          1
          、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
          2
          、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
          3
          、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
          4
          、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
          5
          PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
          6
          、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
          紅曲霉   嗜熱乳酸鏈球菌

          鹿皮色曲霉   紅法夫酵母

          甲型副傷寒沙門菌凍干粉   南方樹舌

          氧化微桿菌   多主枝孢

          居海洛克氏菌   白色念珠菌凍干粉
          大鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)elisa檢測(cè)試劑盒

          大鼠谷氨酰胺合成酶(GS)elisa檢測(cè)試劑盒

          大鼠脫羧酶2(GAD2)elisa檢測(cè)試劑盒

          大鼠脫氫酶(GDH)elisa檢測(cè)試劑盒

          大鼠半連接酶催化亞基(GCLC)elisa檢測(cè)試劑盒
          大鼠腮腺細(xì)胞貓生長(zhǎng)激素(GH)elisa分析檢測(cè)試劑盒

          貓嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)elisa分析檢測(cè)試劑盒

          貓?zhí)妓狒?/span>9(CA9)elisa分析檢測(cè)試劑盒

          貓血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)elisa分析檢測(cè)試劑盒

          貓游離甲狀腺素(FT4)elisa分析檢測(cè)試劑盒


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