詳細(xì)介紹
小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小麥胚芽粉/Wheat gern powderBR500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國(guó)產(chǎn)
NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
OVCAR-3(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人腺細(xì)胞
LoVo(人大腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HFF-1(人包成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
769-P(人腎細(xì)胞腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
COLO 205(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠淋巴瘤細(xì)胞英文名稱:EL4.IL-2
A3(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
神經(jīng)膠質(zhì)瘤英文名稱:G422瘤
Andersons Rhododendron Medium with VitaminsBR10升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人腺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SCCRAM湯/SCCRAM Broth濾膜法食品中沙門氏菌前增菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
甘氨酸培養(yǎng)基/Glycine Medium彎曲桿菌甘氨酸耐受性試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人前列腺細(xì)胞英文名稱:PC-3
TPY瓊脂培養(yǎng)基/TPY Medium用于雙岐桿菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
緩沖MUG瓊脂/緩沖4-甲基傘形酮葡糖苷酸瓊脂/Buffered MUG Agar濾膜MUG法檢測(cè)食品中大腸菌數(shù)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液-BSA5x1ml國(guó)產(chǎn)
牛膽粉/牛膽汁粉/牛膽抽提液/Bile powder of cowBR,40%100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞英文名稱:NR8383碳?xì)溻c(25GM)Sodium Bicarbonate , Endotoxin and cell culture tested.
泛鈣(25GM)D-Calcium Pantothenate, CAS# 137-08-6; MW 238.27; USP
5-TAMRA, SE [5-羧基四甲基羅丹明,琥珀酰亞胺酯] 單體5-TAMRA, SE [5-Carboxytetramethylrhodamine, succinimidyl ester] Single isomer
臺(tái)盼超級(jí)藍(lán)鈉鹽 0。1M水溶液Trypan UltraBlue, sodium salt 0。1 M aqueous solution
Caspase 9熒光底物(Ac-LEHD)2-R110(Ac-LEHD)2-R110
鈣離子熒光探針Rhod-2, AM 超級(jí)純Rhod-2, AM UltraPure Grade
6-熒光素氨基磷酯6-Fluorescein phosphoramidite
iFluor 532-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/mliFluor 532-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Cyanine 3。5胺 [相當(dāng)于Cy3。5胺]Cyanine 3。5 amine [equivalent to Cy3。5 amine]
Cy5NS 琥珀酰亞胺酯Cy5NS succinimidyl ester
2C-H (hydrochloride) (10 mg)2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride; 2,5-Dimethoxyphenethylamine; 2C-H (hydrochloride)
BIM5078 (25 mg)1-[(2-chloro-5-nitrophenyl)sulfonyl]-2-methyl-1H-benzimidazole; BIM5078
17-phenyl trinor Prostaglandin D2 (5 mg)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-oxo-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 17-phenyl trinor PGD2; 17-phenyl trinor Prostaglandin D2
2-amino-5-methyl-4-phenyl Thiazole (500 mg)5-methyl-4-phenyl-2-thiazolamine; NSC 54435; 2-amino-5-methyl-4-phenyl Thiazole
CAY10587 (5 mg)4-[2-(2-methylphenyl)ethynyl]-benzenepropanoic acid; CAY10587
N-octadecanoyl-L-Homoserine lactone (50 mg)N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-octadec*; C18-HSL; N-octadecanoyl-L-Homoserine lactone
小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 MS-275 (25 mg)N-[[4-[[(2-aminophenyl)amino]carbonyl]phenyl]methyl]-3-pyridinylmethyl ester, carbamic acid; SNDX 275|Entinostat; MS-275
ST638 (10 mg)2-cyano-3-[3-ethoxy-4-hydroxy-5-[(5-phenylthio)methyl]phenyl]-2-propenamide; ST638
Celastramycin A (10 mg)(3-chloro-5-hexyl-2,6-dihydroxyphenyl)(4,5-dichloro-1H-pyrrol-3-yl)-methanone; Celastramycin A