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小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse hepatitis B virus e antigen,HBeAg ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
SW 1990(人胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
QGY-7703(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
Calu-6(人肺退行性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
mRTEC, 小鼠腎小管上細(xì)胞gersion
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IAR20(大鼠肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Caov-3(人突狀卵巢腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
ES-2(人卵巢透明細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
BABL/C小鼠胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱:BABL/3T3
小鼠表角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
0.5%葡萄糖湯培養(yǎng)基/0.5% Dextrose Broth Medium環(huán)氧乙烷消毒和電離輻射消毒過(guò)程檢測(cè)指示菌(枯草桿菌黑色變種芽孢及短小桿菌芽孢)培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人視網(wǎng)膜色素上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
M-FC湯/濾膜糞大腸菌湯/M-FC Broth大腸桿菌群的濾膜法檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人淋巴內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大腸菌群顯色培養(yǎng)基配套平皿/Coliform Chromogenic Medium Dish9㎝/塊國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
麥角甾苷規(guī)格:1g/支;98%
酪胨瓊脂/Peptone From Casein Agar藥品、生物制品無(wú)菌試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
糖發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
UACC-812(人腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
乙酰胺酚紅瓊脂/Acetamide Agar250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
RM-1(小鼠前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HOS(人骨瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
KU812(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞
U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2 AdoMet SAM disulfate p-toluenesulfonate; SAMeS-Adenosyl-L-methionine disulfate tosylate
Z-Val-Phe-CHO; Carbobenzoxy-valinyl-phenylalaninal; Calpain Inhibitor IIIMDL 28170
L-Threoascorbic acid, Antiscorbutic factor, Vitamin CL-Ascorbic acid
5-(2,2-Difluoro-benzo[1,3]dioxol-5-ylmethylene)-thiazolidine-2,4-dioneAS 604850
4-(3-Phenyl-[1,2,4]- thizdiazol-5-yl)-piperazine-1-carboxylic acid phenylamideJNJ-1661010
D-(Chloramphenicol
N-Isobutyl-N-(4-methoxyphenylsulfonyl)glycyl hydroxamic acidMMP-III Inhibitor, NNGH
(6S)-OTX015
Nicotinamide adenine dinucleotide, β-DPN, β-NAD, CoenzymeNAD
T20 (PBS) Blocking BufferEZBlock T20 (PBS) Blocking Buffer
Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Fatty Acid Low, pH – 5.2Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Fatty Acid Low, pH – 5.2
Bafilomycin A1 (1 mg)-(1-methylethyl)-2H-pyran-2-yl]butyl]-3,15-dimethoxy-5,7,9,11-tetramethyl-oxacyclohexadeca-3,5,11,13-tetraen-2-one; NSC 381866; Bafilomycin A1
Boc-Leu-Ser-Thr-Arg-AMCBoc-Leu-Ser-Thr-Arg-AMC
Vitamin D2 (1 g)trimethyl-2-hexen-1-yl]-4H-inden-4-ylidene]ethylidene]-cyclohexanol; Ergocalciferol|Calciferol|Fortodyl|Infron|Mulsiferol|NSC 62792|Radiostol|Uvesterol D; Vitamin D2
8-iso-17-phenyl trinor Prostaglandin F2β (50 mg)8-iso-17-phenyl trinor Prostaglandin F2β, 9.beta.,11.alpha.,15S-trihydroxy-17-phenyl-(8.beta.)-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
JWH 210-d9 (5 mg)JWH 210-d9, (4-ethyl-1-naphthalenyl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-methanone-2,2’,3,3’,4,4’,5,5,5-d9
小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法17-trifluoromethylphenyl-13,14-dihydro trinor Prostaglandin F1α (50 mg)17-TFM-PGF1α, 17-trifluoromethylphenyl-13,14-dihydro trinor Prostaglandin F1α, 9.alpha.,11.alpha.,15S-trihydroxy-17-trifluoromethylphenyl-18,19,2-trinor-prostan-1-oic acid
Fructose Assay Buffer (5X) (6 ml)Fructose Assay Buffer
巴佛洛霉素A1Bafilomycin A1