詳細介紹
小鼠膠原酶II(Collagenase II)elisa試劑盒樣本 英文名稱:Mouse Collagenase Type II ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Mouse Collagenase Type II ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠膠原酶II(Collagenase II)elisa試劑盒樣本實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠膠原酶II(Collagenase II)elisa試劑盒樣本樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠膠原酶II(Collagenase II)elisa試劑盒樣本操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠膠原酶II(Collagenase II)elisa試劑盒樣本安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
NCI-H1650(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
錳營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基/Manganese Nutrient Agar Medium250克國產(chǎn)/進口
大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞*培養(yǎng)基100mL
胃蛋白胨BR250克國產(chǎn)/進口
SW480(人結(jié)腸細胞)5×106cells/瓶×2
RT4(人膀胱移行細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
Poly-D-lysine溶液規(guī)格:2mggersion
Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2
MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞gersion
NRK(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2
HSC-T6(大鼠肝星形細胞)5×106cells/瓶×2
BRL(大鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2
EBTr (NBL-4) (牛胚氣管細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腺英文名稱:EMT-6
Ana-1(小鼠巨噬細胞)5×106cells/瓶×2
顯影粉10包(10 × 250 ml)國產(chǎn)
3% NaC1精氨酸脫羧酶發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
人腎透明細胞腺細胞英文名稱:786-0
Nitsch培養(yǎng)基(含維生素)/Nitsch Medium with vitaminsBR10升國產(chǎn)/進口
人結(jié)腸細胞英文名稱:HCT 116
豆粉瓊脂/血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基/血液瓊脂基礎(chǔ)/Blood Agar Base供分離營養(yǎng)要求較高的致病菌用250克國產(chǎn)/進口
結(jié)晶紫染色液規(guī)格:100ml
鈉結(jié)晶紫增菌液/Sodium Chloride Violet Purple Enrichment Broth副溶血弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
大鼠下脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL
山梨醇麥康凱瓊脂基礎(chǔ)/山梨醇麥康克瓊脂基礎(chǔ)/SMAC大腸桿菌O157:H7的選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口N-IWP-4
β-NMN, β-Nicotinamide ribose monophosphate, NMN, Nicotinamide ribotide, Nicotinamide-1-ium-1-β-D-ribofuranoside 5’-phosphateβ-Nicotinamide mononucleotide
PBS Blocking BufferEZBlock (PBS) Blocking Buffer
Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Fatty Acid Low, pH – 7.0Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Fatty Acid Low, pH – 7.0
PtdIns-(1-arachidonoyl-d8, 2-arachidonoyl) (sodium salt) (25 ug)etraenoyl-5,6,8,9,11,12,14,15-d8-2R-(5Z,8Z,11Z,14Z)-eicosatetraenoylphosphatidyl)inositol, monosodium salt; PtdIns-(1-arachidonoyl-d8, 2-arachidonoyl) (sodium salt)
Ala-Ala-Phe-chloromethylketoneAla-Ala-Phe-chloromethylketone
GeldanamycinGeldanamycin
D-myo-Inositol-1,4,6-triphosphate -sodium salt) (5 mg)1,4,6-IP3 (sodium salt)|Ins(1,4,6)-P3 (sodium salt), D-myo-Inositol-1,4,6-triphosphate -sodium salt), D-myo-Insitol-1,4,6-tris(dihydrogen phosphate), trisodium salt
Bupropion -hydrochloride) (250 mg)NSC 315851, Bupropion -hydrochloride), 1-(3-chlorophenyl)-2-[(1,1-dimethylethyl)amino]-1-propane, monohydrochloride
16-phenyl tetranor Prostaglandin E2 (50 mg)16-phenyl tetranor PGE2, 16-phenyl tetranor Prostaglandin E2, 9-oxo-11.alpha.,15S-dihydroxy-16-phenyl-17,18,19,2-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
Maltose Standard (300 ul)Maltose Standard
TF1 CPG 1000 的EDANS替代品Tide Fluor 1 CPG [TF1 CPG] 1000 Superior replacement to EDANS
小鼠膠原酶II(Collagenase II)elisa試劑盒樣本水鈣(2.5KG)Calcium Chloride, Dihydrate, CAS# 10035-04-8; MW 147.01; ≥99%
無水硫鎂(10KG)Magnesium Sulfate, Anhydrous, CAS# 7487-88-9; ≥98%
特美?。?GM)Timentin, 15:1 Ticarcillin Disodium Salt / Potassium Clavulanate Mixture
3-氰基-7-羥基香豆素 熒光參照標準3-Cyano-7-hydroxycoumarin Fluorescence reference standard
EDANS [5-(2-氨基乙氨基)-1-萘磺]EDANS acid [5-((2-Aminoethyl)amino)naphthalene-1-sulfonic acid]