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          小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟

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          • 品牌 R&D/美國(guó)
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2017-03-14 17:27:06瀏覽次數(shù):280

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟的含量。

          詳細(xì)介紹

          小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟安全性
          1. 避免人體直接接觸顯色劑AB和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
          2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
          3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
          小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
          1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
          2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
          3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
          小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱(chēng):Mouse phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
          英文名稱(chēng):Mouse phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit   
          規(guī)格:96T/48T
          主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
          性狀:盒裝液體
          人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
          標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
          種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
          小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
          1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
          3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
          4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
          5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
          6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱(chēng)取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
          7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
          8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
          小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
          1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
          2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
          3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
          4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
          5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
          6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
          7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,再加入顯色劑 B  50ul
          8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。 
          注意事項(xiàng):
          1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
          2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
          3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
          4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
          5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)?jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
          6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),可和所購(gòu)經(jīng)銷(xiāo)商, 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

          鏈霉素-青霉素(100X)規(guī)格:100ml

          亮綠糖培養(yǎng)基/Brilliant Green Lactose Medium飲用天然礦泉水中大腸桿菌檢驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

          大鼠腮腺細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          色氨酸肉湯發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

          U-2 OS(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          游離生物素測(cè)定培養(yǎng)基/Free Biotin Assay Medium嬰兒食品和粉中游離生物素測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

          RKO-AS45-1(人結(jié)腸轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          四號(hào)瓊脂基礎(chǔ)/四號(hào)瓊脂/NO.4 Agar Base霍亂弧菌選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

          HA(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          SW 780(人膀胱移行細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          QSG-7701(人正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

          CEM/C1(人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          mRTEC, 小鼠腎小管上細(xì)胞gersion

          RBE(人膽管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          IBRS-2(豬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          CCD-1095Sk(人腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管旁膚細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          F81(貓腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          小鼠腎小管上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          BABL/C小鼠胚胎細(xì)胞英文名稱(chēng):BABL/C2

          小鼠腸動(dòng)脈內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          Ampicillin(100mg/ml,1000X)規(guī)格:5*1ml

          人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          M-FC瓊脂/濾膜糞大腸菌瓊脂/M-FC Agar大腸桿菌群的濾膜法檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

          人淋巴血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

          大腸菌群顯色培養(yǎng)基/Coliform Chromogenic Medium快速準(zhǔn)確檢測(cè)大腸菌群,大腸菌群培養(yǎng)24小時(shí),顯蘭色1升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口JWH 018-d9 (solution) (500 ug)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-2,2,3,3,4,4,5,5,5-d9-methanone; AM678; JWH 018-d9 (solution)

          Sildenafil Citrate (25 mg)5-[2-ethoxy-5-[(4-methyl-1-piperazinyl)sulfonyl]phenyl]-1,6-dihydro-1-methyl-3-propyl-2-hydroxy-1,2,3-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-one; Viagra

          20-hydroxy Prostaglandin E2 (100 ug)9-oxo-11α,15S,20-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 20-hydroxy PGE2; 20-hydroxy Prostaglandin E2

          Prostaglandin F2α 1,11-lactone (1 mg)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, 1,11-lactone; PGF2α 1,11-lactone; Prostaglandin F2α 1,11-lactone

          15(R)-15-methyl Prostaglandin F2α (10 mg)9。alpha。,11。alpha。,15R-trihydroxy-15-methyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(R)-15-methyl PGF2α; 15(R)-15-methyl Prostaglandin F2α

          NBD-FTY720 phenoxy (hydrochloride) (500 ug)N-[2R-hydroxy-1R-(hydroxymethyl)-3E-heptadecenyl]-2-amino-2-[2-(4-octylphenyl)ethyl]-1,3-propanediol,monohydrochloride; NBD-FTY720 phenoxy (hydrochloride)

          Prostaglandin K1 (1 mg)9,11-dioxo-15S-hydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; PGK1; Prostaglandin K1

          Prostaglandin A2-d4 (500 ug)9-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,10,13E-trien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; PGA2-d4|Medullin-d4; Prostaglandin A2-d4

          5-OxoETE (25 ug)5-oxo-6E,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; 5-KETE; 5-OxoETE

          13(R)-HODE (50 ug)13R-hydroxy-9Z,11E-octadecadienoic acid; 13(R)-HODE

          小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟Human Plasma (100 dtn)Human Plasma

          8-Isoprostane Express EIA Antiserum (100 dtn)8-Isoprostane Express EIA Antiserum

          20-羥基蛻皮激素 AChE 示蹤物(100 dtn)20-Hydroxyecdysone AChE Tracer

          PPARγ FP Assay Ligand Control (1 ea)PPARγ FP Assay Ligand Control

          Cell-Based Assay Verapamil (50 ul)Cell-Based Assay Verapamil

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