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小鼠骨保護(hù)素(OPG)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱(chēng):Mouse Osteoprotegerin,OPG ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠骨保護(hù)素(OPG)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠骨保護(hù)素(OPG)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠骨保護(hù)素(OPG)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
HBL-100(人整合SV40基因的腺上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
冬克青霉 Penicillium donkii Stolk
人十二指腸腺細(xì)胞英文名稱(chēng):HuTu-80
人非小細(xì)胞肺腺細(xì)胞英文名稱(chēng):NCI-H157
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人結(jié)腸細(xì)胞英文名稱(chēng):COLO320/DM
屎腸球菌 Enterococcus faecium
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞 Rattus
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces diastatochromogenes
黃綠綠僵菌 Metarhizium flavoviride
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
中華鱉肺來(lái)源細(xì)胞英文名稱(chēng):CSSTL1
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
灰色鏈霉菌 Streptomyces griseus
珊瑚色諾卡氏菌 Nocardia corallina
小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
香菇 Lentinula edodes
HEL(人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 5-Chloro-N-[4-(cyclohexylureidosulfonyl)phenethyl]-2-methoxybenzamide; Glyburide, N-p-[2-(5-Chloro-2-methoxybenzamido)ethyl]benzenesulfonyl-N’-cyclohexylureaGlibenclamide
Vincaleukoblastine sulfate salt; VLBVinblastine Sulfate
4-[4-(1,3-benzodioxol-5-yl)-5-pyridin-2-yl-1H-imidazol-2-yl]benzamideSB-431542
N-(2-Benzoylphenyl)-L-tyrosine PPARγ Agonist; (2S)-((2-Benzoylphenyl)amino-3-[4-[2-(methylpyridin-2-ylamino)ethoxy]phenyl]propionic acidGW1929
chloro[[2,EUK-134
N-PCI 34051
Sulfosuccinimidyl-2-(biotinamido)-ethyl-1,3’-dithiopropionate; Biotin disulfide N-Hydroxysulfosuccinimide esterSulfo-NHS-SS-Biotin
6-[4-(1-Cyclohexyl-1H-tetrazol-5-yl)-butoxy]-3,4-dihydro-2(1H)-quinolinoneCilostazol
3-[6-[[4-(Trifluoromethoxy)phenyl]amino]-4-pyrimidinyl]benzamideGNF-2
7-methoxy-4-((6-phenyl-[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl)methoxy)quinolineAMG-208
4-N-(5-cyclopropyl-1H-pyrazol-3-yl)-6-(4-methylpiperazin-1-yl)-2-N-[(3-propan-2-yl-1,2-oxazol-5-yl)methyl]pyrimidine-2,4-diamineXL-228
5-[[2-[(3R)-3-Aminopiperidin-1-yl]biphenyl-3-yl]methylidene]-1,3-thiazolidine-2,4-dioneAZD1208
FluorLast with DABCOFluorLast with DABCO
Histone H2A PeptideHistone H2A Peptide
小鼠骨保護(hù)素(OPG)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法H3 Positive Control (12。5 nmol)H3 Positive Control
哌立福辛(抗腫瘤藥Perifosine
DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 6-8 kDaDiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 6-8 kDa
C-12 NBD Ceramide (25 mg)N-C12-NBD-D-erythro-Sphingosine, C-12 NBD Ceramide, N-[(1S,2R,3E)-2-hydroxy-1-(hydroxymethyl)-3-heptadecen-1-yl]-12-[(7-nitro-2,1,3-